二手ABI QuantStudio™ 5 實時熒光定量PCR儀技術評估與應用介紹

一、儀器概述

QuantStudio™ 5 實時熒光定量PCR儀由Applied Biosystems（現隸屬于賽默飛Thermo Fisher Scientific）推出，是QuantStudio系列中一款定位于中通量、功能完備、界面友好的定量PCR平臺。該設備兼具96孔與384孔反應模塊的可選性，采用LED光源和先進的光學檢測系統，可滿足多種常規核酸檢測與表達分析任務。

對于采購二手設備的用戶而言，QuantStudio 5憑借結構緊湊、性能穩定、操作軟件直觀等特征，具有較高的再利用價值，在高校實驗室、生物技術公司及第三方檢測機構中仍有較大使用需求。

二、技術參數與系統結構

1. 溫控性能

• 模塊類型：標準96孔鋁模塊（0.2 mL 反應孔）；

• 升降溫速率：升溫約3.5°C/s，降溫約3.0°C/s；

• 溫控準確性：±0.25°C；

• 溫度均一性：<0.4°C（在90秒保持期內）；

• 熱蓋溫度范圍：30°C–105°C，可調節壓力以適配不同封膜。

2. 光學系統

• 激發光源：高強度LED；

• 檢測方式：多通道熒光檢測系統（最多支持6個通道）；

• 支持染料：FAM™, VIC®, SYBR® Green, ROX™, TAMRA™, JOE™, HEX™等；

• 采集方式：每循環末實時采集熒光信號，光學無接觸掃描；

• 校正機制：自動進行熒光漂移和參考染料校正（ROX為推薦參考）。

3. 兼容耗材

• 96孔板（0.2 mL，快裝板或獨立管）；

• 高透明封膜、粘蓋膜、光學蓋板；

• 建議使用原廠或兼容性測試合格耗材，避免因孔位不一致影響光路。

三、軟件與數據處理功能

QuantStudio Design & Analysis 軟件為該系統配套軟件，支持多種實驗設計和結果分析模式：

1. 實驗設置

• 預設模板：絕對定量、相對定量、SNP分析、標準曲線、熔解曲線分析等；

• 自定義程序編排：設置循環參數、熒光采集時間點；

• 多用戶賬戶系統，便于管理大型實驗室數據權限。

2. 數據分析

• Ct值提取：自動/手動設定閾值；

• 相對表達分析：支持ΔΔCt法，歸一化目標基因表達；

• SNP判型：通過末端熒光強度判斷基因型；

• 圖形輸出：擴增曲線、熔解曲線、熒光散點圖等可導出圖像。

3. 遠程控制與云平臺

• 通過Thermo Fisher Cloud遠程設計實驗、監控運行狀態；

• 可實現多臺設備數據集中管理與備份；

• 支持移動設備端口遠程訪問（部分型號升級后可實現）。

四、常見應用方向

QuantStudio 5適用于基礎研究與應用檢測的多種核酸實驗：

1. 基因表達分析

• 利用SYBR或TaqMan探針，評估不同處理下的mRNA表達；

• 可對多個目標基因同時檢測，實現相對定量研究。

2. SNP/突變檢測

• 適用于單堿基突變或小范圍結構變異檢測；

• 支持等位基因判型（如AA、AG、GG）；

• 可拓展至個體化醫學、疾病篩查研究。

3. 微生物/病毒載量檢測

• 檢測細菌、病毒、支原體等特定病原體DNA/RNA；

• 常用于環境檢測、疫病篩查和藥效評估。

4. 拷貝數變異分析（CNV）

• 精確定量染色體片段或特定位點的DNA拷貝數變化；

• 廣泛用于癌癥、遺傳病等研究。

5. 農產品/食品成分檢測

• GMO成分檢測；

• 動植物來源成分識別。

五、二手設備選購注意事項

購買二手QuantStudio 5系統，應從以下維度評估設備狀態與價值：

1. 核心部件檢查

• 熱模塊是否升降溫穩定（可進行水測試）；

• 光學通道校準是否準確；

• 是否有報錯或通信中斷記錄；

• 是否可成功運行完整的熒光擴增實驗。

2. 軟件與系統版本

• 是否包含正版授權的軟件（Design & Analysis）；

• 是否支持最新Win10系統或可升級；

• 云平臺功能是否激活；

• 是否提供完整操作手冊與驅動包。

3. 外觀與配件

• 主機外殼是否破損、按鍵功能是否失靈；

• 是否提供原廠或合格的96孔模塊；

• 配套的反應板托架、封膜壓蓋器是否齊全。

4. 歷史記錄

• 設備出廠時間與使用年限；

• 是否經過正規授權商維修；

• 是否有校準與維護記錄；

• 是否經過污染清洗和溫控/光學檢測校準。

六、設備適配場景評估

作為一款定位于中通量科研與臨床研究的實時熒光PCR平臺，QuantStudio 5適合以下機構與用途：

相較全新設備，二手QuantStudio 5在預算有限場景下，提供了一種可行解決方案，只要設備狀態良好并有可追溯維修記錄，能維持相當水平的實驗性能。

七、結語

ABI QuantStudio 5 實時定量PCR儀以其可靠的溫控系統、靈敏的熒光檢測機制、便捷的圖形化軟件及良好的通用性，在多種核酸檢測實驗中被廣泛采用。若評估通過，選購二手設備可在控制成本的同時滿足實驗需求。

在實際購置前，建議要求賣方提供以下資料以作進一步判斷：

• 儀器序列號及出廠年份；

• 運行日志截圖；

• 最近一次擴增實驗的報告；

• 售后服務與運輸保障條款。