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固相萃取(SPE)的核心原理與保留策略

來源:廣州綠百草科學儀器有限公司   2025年05月07日 12:29  

固相萃取(Solid Phase Extraction, SPE)是一種結合液固萃取與柱色譜技術的樣品前處理手段,通過固相吸附劑選擇性吸附目標物,實現復雜基質中化合物的分離與富集。其核心在于利用目標物與吸附劑間的特異性相互作用,結合差異化的保留策略,達到純化或濃縮的目的。以下從基本原理與保留策略兩方面解析其工作機制。


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一、SPE的基本原理

SPE的分離過程基于吸附劑的選擇性保留流動相的梯度洗脫

  1. 吸附:將液體樣品通過固相吸附劑(如C18、離子交換樹脂等),目標物通過疏水、靜電或氫鍵作用被吸附;

  2. 分離:干擾物或基質成分因作用力弱被直接沖走,或通過清洗步驟去除;

  3. 洗脫:使用強溶劑(如甲醇、乙腈或緩沖鹽溶液)將目標物從吸附劑上釋放,完成富集。

該技術可高效處理生物體液、環境水樣等復雜基質,適用于痕量分析(如農藥殘留、藥物代謝物檢測)。


二、SPE的兩種基本保留策略

策略1:通過凈化(吸附干擾物)

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  • 原理:固定相選擇性吸附干擾物,允許目標物直接通過并收集。

  • 操作流程

    1. 活化吸附劑(如硅膠或離子交換樹脂);

    2. 上樣后,目標物隨流動相流出,干擾物被吸附;

    3. 直接收集含目標物的流出液。

  • 適用場景

    • 樣品中干擾物濃度顯著高于目標物(如食品中色素去除);

    • 目標物穩定性差,需避免接觸強洗脫溶劑。


策略2:保留-清洗-洗脫(吸附目標物)

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  • 原理:固定相特異性保留目標物,通過清洗去除雜質后洗脫目標物。

  • 操作流程

    1. 保留:目標物被吸附劑捕獲(如C18通過疏水作用保留非極性化合物);

    2. 清洗:弱溶劑(如水或低濃度甲醇)去除吸附力弱的雜質;

    3. 洗脫:強溶劑(如甲醇-乙酸溶液)解吸目標物。

  • 適用場景

    • 痕量目標物富集(如環境水樣中農藥檢測);

    • 需高純度提取物的分析(如血漿中藥物代謝物分離)。


    三、吸附劑與策略的匹配選擇

  • 反相吸附劑(C18、C8):適合策略2,通過疏水作用保留非極性目標物(如多環芳烴)。

  • 離子交換樹脂(SAX、SCX):適合策略1或2,通過靜電作用吸附帶電化合物(如核酸、蛋白質)。

  • 混合模式吸附劑(HLB):兼具疏水與離子交換作用,適配復雜樣品(如血樣中多類化合物同步富集)。


  • 四、應用與優勢

  • 環境分析:富集水體中痕量有機污染物(策略2);

  • 食品安全:去除果汁中色素與糖分(策略1);

  • 生物醫藥:純化血漿中的藥物分子(策略2)。

SPE通過靈活的保留策略與多樣化的吸附劑,成為高效、可控的樣品前處理工具,顯著提升檢測靈敏度與分析效率,助力精準分析。


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