zeta life胎牛血清培養(yǎng)脂肪細(xì)胞發(fā)表文章已見刊2025已更新

一、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物遺傳資源探索與創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，利用美國(guó)zeta life胎牛血清成功培養(yǎng)兔脂肪細(xì)胞（preaipously）發(fā)表文章已見刊；

二、培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)細(xì)胞名稱：兔脂肪細(xì)胞(preaipologies)

培養(yǎng)：體系6孔板

培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)量：6 × 105

三、用zeta life胎牛血清培養(yǎng)脂肪細(xì)胞(preaip cells)發(fā)表文章部分內(nèi)容：

兔脂肪細(xì)胞的分離和誘導(dǎo)在無菌條件下從新生新西蘭兔的腎周脂肪組織中分離內(nèi)臟脂肪細(xì)胞[1]。簡(jiǎn)而言之，用 0.01% 膠原酶 I (Gibco, Carlsbad, CA, USA) 消化脂肪組織。然后，將脂肪細(xì)胞以每板 6 × 105 個(gè)細(xì)胞的密度接種到wan全培養(yǎng)基（DME/F12，sup [1]，補(bǔ)充有 10% 胎牛血清 [FBS]）中的 6 孔板中（DME/F12 購(gòu)自 Gibco） ，Carlsbad，CA，USA；胎牛血清來自 Zeta life，Menlo Park，CA，USA），脂肪細(xì)胞在加濕器中培養(yǎng)。 37°C 和 5% CO2 培養(yǎng)箱。達(dá)到匯合后（設(shè)定為第 0 天），通過添加分化培養(yǎng)基 I（DME/F12，含 1 μM 地塞米松、500 μM 1-甲基1-3-異丁基黃嘌呤、1.7 μM 胰島素、10% FBS）（地塞米松、 1-甲基1-3-異丁基黃嘌呤和胰島素來自Solarbio，北京，中國(guó)） 72 小時(shí)（第 3 天）。接下來，細(xì)胞用差異[1]培養(yǎng)基II（DME/F12，1.7 μM胰島素，10% FBS）再培養(yǎng)72小時(shí)，并在wan全培養(yǎng)基[1] um中進(jìn)一步培養(yǎng)直至第9天（第9天）。為了鑒定細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)積累并獲得成熟的脂肪細(xì)胞，通過油紅O染色測(cè)量脂滴[1]的積累。根據(jù)三種不同的脂質(zhì)積累表型（幾乎沒有脂滴、少量環(huán)狀脂滴和一簇較大脂滴），總共收集了9個(gè)細(xì)胞樣本，每個(gè)間隔時(shí)間點(diǎn)包含3個(gè)生物樣本。復(fù)制。采用RT-qPCR測(cè)定[1]中脂肪形成標(biāo)志基因的mRNA表達(dá)水平，包括PPARG、CEBPA和FABP4（引物序列見表S1），并采用2-ΔΔCt方法分析[1]。裂解相對(duì)表達(dá)。持家基因 GAPDH 作為對(duì)照。

zeta life胎牛血清信息如下