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synvolux:SAINT試劑常見問題

來源:上海牧榮生物科技有限公司   2025年03月28日 11:38  

SAINT 試劑的儲存

我們所有的 SAINT 試劑均作為即用型轉染試劑在室溫下運輸。到達后,應儲存在 4-7°C 下(不要冷凍)。穩定性研究表明,SAINT 試劑在開封后至少可穩定一年。


我將 SAINT 試劑存放在冰箱中。我還能使用它嗎?

是的!解凍后,SAINT 試劑可能會出現渾濁和更粘稠。使用前,請確保渦旋充分以獲得均勻的分散,或者更好的是,聲音達到透明度。混合物不*全再溶解會導致工作濃度降低。



我可以在有血清的情況下使用 SAINT 嗎?

是的!在血清存在的情況下,SAINT 轉染不會受到抑制。然而,由于 siRNA 極易被血清中存在的 RNA 酶降解,因此可以使用使用 SAINT-sRNA 的替代無血清 siRNA 轉染方案。


抗生素會干擾我的轉染嗎?

不!抗生素對轉染效率沒有影響。


哪些參數會影響轉染結果?

通常,以下參數會影響轉染結果:

  • DNA、RNA、寡核苷酸或蛋白質的純度和濃度

  • 載體序列(啟動子、poly(A)-tail、密碼子使用等)

  • 添加的 SAINT/DNA 復合物量

  • 靶細胞(細胞類型、細胞周期、傳代數等)

  • 蛋白質表達(時間依賴性表達水平、表達蛋白質的毒性等)

與大多數其他轉染試劑和遞送系統一樣,使用高度純化的 DNA、RNA 或蛋白質/肽可獲得最佳結果。

細胞的“轉染性”變化很大。例如,非分裂和非貼壁細胞通常難以轉染,而其他細胞類型可能很容易轉染,轉染效率在 80% 到 100% 之間。此外,某些轉染試劑可能比其他試劑對某些細胞效果更好,而某些試劑可能對特定細胞類型有毒。因此,我們建議花一些時間使用報告基因構建體(如 GFP)優化特定細胞類型的轉染條件。


為什么我使用雙倍量的 SAINT 時,我的轉染效率沒有翻倍?

SAINT-DNA/sRNA/mRNA 中的陽離子組分與帶負電荷的 DNA/siRNA/mRNA 之間的電荷比對于高效轉染非常重要。作為起點,我們建議使用 1:20 比例的 DNA/RNA:SAINT 試劑 (w:v)(例如,對于 12 孔規格,0.5 ug DNA:10 ul SAINT-DNA)。為了在您的實驗中獲得最佳轉染結果,值得優化 DNA/RNA 劑量(例如,對于 12 孔規格,0.25 ug – 1 ug DNA)和 DNA/RNA:SAINT 試劑比例(例如,對于 12 孔規格,1:10 – 1:40)。


我應該使用哪種 SAINT 試劑進行 DNA、RNA 和/或蛋白質的共轉染?

我們的 SAINT 試劑針對 DNA (SAINT-DNA)、siRNA (SAINT-sRNA)、mRNA (SAINT-mRNA) 和蛋白質 (SAINT-protein) 的轉染進行了優化,但它們都可以在一定程度上遞送其他分子。根據您的實驗要求,您可以將一種 SAINT 試劑用于兩個不同的分子,或者每個分子使用特定的 SAINT 試劑。


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