沖洗對色譜柱的影響
用純水短時間內沖洗色譜柱,通常不會對色譜柱造成較大的損傷,但如果長時間用水沖洗色譜柱則可能引起固定相流失和相塌陷現象,所以若非必要請盡量避免用純水沖洗色譜柱,建議在水中加入一定量的甲醇或乙腈進行沖洗,通常水的含量<90%不會對色譜柱造成任何影響。
原因分析:
首先,由于目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質,硅膠的溶解特點是在純水中的溶解度比在含有一定濃度有機溶劑的流動相中要大得多,所以長時間的用純水沖洗會導致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,對于常規的C18柱而言,由于C18長鏈與水是不互溶的,C18長鏈之間的相互作用力大于C18 與水分子的作用力,長時間的用水沖洗,使得C18 長鏈之間相互靠近,水流的沖刷,導致相互聯結的C18 長鏈倒伏在硅膠基質的表面,對疏水性物質的保留能力下降,即相塌陷。針對用純水沖洗容易出現相塌陷的現象,有些廠家推出了純水柱,這種純水柱可以用純水作流動相而不會產生相塌陷,這對只溶于純水的樣品的分析提供了一個很好的選擇。
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