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丁基疏水色譜柱是一款以丁基鍵合無孔型親水性聚合物基質(zhì)為填充劑的疏水作用色譜柱。其填料材料通常采用具有丁烷基疏水性質(zhì)的有機(jī)硅，這種材料既具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，又能有效地保持化合物分子的親疏水平衡。此外，也有以粒徑為2.5微米的丁基鍵合無孔型親水性聚合物基質(zhì)為填充劑的疏水色譜柱，如TSKgel Butyl-NPR色譜柱。
丁基疏水色譜柱的分離機(jī)理與反相色譜基本相同，都是利用溶質(zhì)與固定相間的疏水相互作用實(shí)現(xiàn)分離。不同的是，其固定相的疏水性不如反相固定相強(qiáng)，多為低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。在高濃度鹽溶液中，親水性較強(qiáng)的物質(zhì)分子內(nèi)部的疏水基團(tuán)外露，可與疏水的固定相以疏水作用力相結(jié)合（吸附）。由于這種作用力大小不同，可以通過改變極性流動(dòng)相的離子強(qiáng)度（由高到低）使其依次解吸附，從而實(shí)現(xiàn)分離。
丁基疏水色譜柱的應(yīng)用范圍廣泛，主要包括以下幾個(gè)方面：
1、生物大分子分離分析
蛋白質(zhì)：可用于蛋白質(zhì)的分離純化，例如在生物制藥領(lǐng)域，對重組蛋白藥物（包括單抗）的非均一性分析中發(fā)揮重要作用。一些丁基疏水色譜柱能夠?qū)﹄x子交換色譜法無法分離的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)異構(gòu)體進(jìn)行分離，還適用于在酸性條件下分離親水性的多肽。
酶：可以對酶等生物大分子進(jìn)行分析和分離，幫助研究人員了解酶的性質(zhì)、結(jié)構(gòu)和功能，以及在不同條件下的行為變化。
核酸：對于核酸類生物大分子，丁基疏水色譜柱也有一定的分離能力，可輔助研究核酸的結(jié)構(gòu)與功能。
2、有機(jī)化合物分離
脂溶性化合物：丁基疏水柱常用于高效液相色譜（HPLC）分離脂溶性化合物，如脂肪酸、磷脂等親脂性化合物的分離效果較好。
有機(jī)酸、有機(jī)堿：能夠分離多種有機(jī)酸、有機(jī)堿等化合物，在化學(xué)合成、藥物研發(fā)等領(lǐng)域有重要應(yīng)用，可用于監(jiān)測反應(yīng)過程中有機(jī)化合物的純度和含量。
3、多糖分離
可以用于分離大大小小的多糖，在多糖的結(jié)構(gòu)鑒定、性質(zhì)研究以及相關(guān)藥物開發(fā)等方面具有應(yīng)用價(jià)值。
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