活動內(nèi)容：

購買1瓶賽多培®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基（規(guī)格：500mL）或1袋賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基（規(guī)格：10L），送2瓶大腸桿菌專用破菌液（規(guī)格：500mL）或1支甘油菌株（規(guī)格：0.5mL， TOP10、DH5a、Bl21（DE3）任選一種）

注：1. 活動日期：截止到2025年3月31日；

2. 終端與經(jīng)銷活動一致；

3. 本活動最終解釋權(quán)歸賽爾瑞成（北京）生命科學(xué)技術(shù)有限公司所有。

一、賽多培^®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基

      賽多培^®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基是賽爾瑞成研發(fā)的一種適合于大腸桿菌生長和蛋白表達的即用型全成分培養(yǎng)基。使用該培養(yǎng)基，只需一步操作，無需添加IPTG誘導(dǎo)劑，即可收獲含表達蛋白的菌體，與常規(guī)方法相比，對絕大多數(shù)蛋白表達，其菌體生物量和對應(yīng)的目的蛋白都明顯提高數(shù)倍以上。

☆ 產(chǎn)品優(yōu)勢

1. 操作簡單，提高效率
直接挑取單菌落或用甘油菌接種，一步操作，然后培養(yǎng)過夜或培養(yǎng)至平臺期收菌，中間不用監(jiān)測生長狀態(tài)（監(jiān)測OD值），不用添加誘導(dǎo)劑。節(jié)省人力和儀器設(shè)備。

2. 全成分，即用型
全成分配方，支持大腸桿菌長時間生長和蛋白持續(xù)表達，不含潛在有毒有害物質(zhì)（如IPTG）。

3. 菌體收獲量大，蛋白產(chǎn)率高
與常規(guī)誘導(dǎo)表達（LB培養(yǎng)基或2YT培養(yǎng)基，IPTG誘導(dǎo)）相比，對于絕大多數(shù)蛋白表達系統(tǒng)，無論是培養(yǎng)相同的時間還是都培養(yǎng)至菌體生長平臺期，用賽多培^®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基所收獲的菌體生物量以及對應(yīng)的目的蛋白產(chǎn)量都明顯增高，最高可達數(shù)倍以上。

4. 適用范圍廣
1）可適用于大腸桿菌各種以IPTG為誘導(dǎo)劑的載體，包括lac啟動子載體，tac啟動子載體以及T7啟動子載體等，如pGEX系列載體（GST融合載體），pET系列載體等常用載體；
2）既適用于低溫表達（如18°C，22°C或25°C），也適用30°C和37°C表達；
3）既適用于可溶表達，也適用于包涵體表達。

☆ 蛋白表達情況對比

賽多培^®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基與普通LB培養(yǎng)基（IPTG常規(guī)誘導(dǎo)）培養(yǎng)過夜后蛋白表達對比：
培養(yǎng)條件：30°C，200rpm；
LB培養(yǎng)基誘導(dǎo)條件：OD600=1.0加IPTG終濃度為1mM，繼續(xù)培養(yǎng)過夜（約20小時）。

注：  1： LB培養(yǎng)基IPTG誘導(dǎo)      2： 賽多培^®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基

賽多培^®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基與普通LB培養(yǎng)基（IPTG常規(guī)誘導(dǎo)）培養(yǎng)終了時蛋白表達對比：
培養(yǎng)條件：30°C，200rpm；
LB培養(yǎng)基誘導(dǎo)條件：OD600=1.0加IPTG終濃度為1mM，繼續(xù)培養(yǎng)至平臺期（約22-24小時）；
賽多培^®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基培養(yǎng)至平臺期約40-48小時。

注： 1： LB培養(yǎng)基IPTG誘導(dǎo)      2： 賽多培^®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基

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二、賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基

      傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基是一種普通的細菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl，其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源，磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供無機鹽。賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基是賽爾瑞成在傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而來，能夠較傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基大大提高菌體密度，提高目的蛋白表達量數(shù)倍。

       使用賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基進行大腸桿菌培養(yǎng)時，流程與傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基使用方法一致，與“賽多培®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基”有所區(qū)別的是，賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基仍需添加IPTG進行目標蛋白的誘導(dǎo)表達。

☆ 應(yīng)用案例
1. 大腸桿菌DH5α培養(yǎng)對比結(jié)果
       以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基，37°C，180rpm培養(yǎng)：

2. 大腸桿菌BL21(DE3)培養(yǎng)對比結(jié)果
       以含有質(zhì)粒pET21a-O的BL21(DE3)為測試菌種（該菌種表達蛋白O）。以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基（含相應(yīng)抗生素），37°C，180rpm培養(yǎng)：

3. 大腸桿菌BL21(DE3)/pET21a-O誘導(dǎo)表達培養(yǎng)對比結(jié)果
       以含有質(zhì)粒pET21a-O的BL21(DE3)為測試菌種（該菌種表達蛋白O）。以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基（含相應(yīng)抗生素），37°C，180rpm培養(yǎng)，至OD600=1時，加入IPTG（終濃度1mM）誘導(dǎo)表達外源蛋白，繼續(xù)37°C培養(yǎng)：

結(jié)論：在本次培養(yǎng)基和誘導(dǎo)表達條件下，O蛋白在賽多培®增強型LB預(yù)混培養(yǎng)基中的表達總量明顯高于傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基。

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三、大腸桿菌專用破菌液

☆ 產(chǎn)品優(yōu)勢

1. 節(jié)省成本
只需將菌體與破菌液簡單混勻，然后凍融即可，不需要超聲儀就能使菌體破碎，釋放可溶上清。節(jié)省儀器成本和人力成本。

2. 組成成分溫和
不含還原劑、強變性劑、離子型去污劑等烈性成分，對絕大多數(shù)蛋白結(jié)構(gòu)和活性無影響。

3. 可用于高通量篩選工程菌

原位破菌，篩選成本更低，適用于各種型號培養(yǎng)板（如96孔板、48孔板、6孔板等）。

4. 使用搭配靈活
可搭配賽爾瑞成超級核酸酶（貨號：CR1001），降解菌體裂解后的核酸，以降低破菌液粘度，以利于后續(xù)操作；也可以根據(jù)需要添加蛋白酶抑制劑、還原劑、NaCl等成分。

☆ 數(shù)據(jù)對比

注：  1：大腸桿菌專用破菌液破菌上清    2：大腸桿菌專用破菌液破菌沉

                                                                       3：超聲破菌破菌上清                     4：超聲破菌破菌沉淀
                                                                       M：蛋白Marker

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四、大腸桿菌菌株

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