在動物模型中，腦神經退行性生物標志物會排入頸部淋巴結 （CLN），并且引流功能會隨著年齡的增長而降低。如果這發生在人類中，CLN 可能提供一種易于獲得的蛋白質清除率方面的測量方法。本研究提供了在人類 CLN 中可檢測到神經退行性生物標志物的第一個證據。結果顯示除NFL外，所有 CLN 生物標志物濃度均顯著高于血漿濃度，p-Tau181，其 CLN 濃度隨年齡增長而降低。CLN-血漿生物標志物比率升高表明它們在 CLN 中的濃度可能為腦清除和淋巴引流提供了一個測量方式，可能適用于衰老研究和未來的臨床試驗。

期刊：Brain 2024年10月

牛津大學 精神病學系

瑞典哥德堡大學

研究背景

神經退行性疾病的特征是異常蛋白質在大腦中積累。阿爾茨海默病的病理標志是 β 淀粉樣蛋白斑塊和高度磷酸化的tau纏結。這些神經退行性生物標志物可以在腦脊液和血液中測量，為阿爾茨海默病和其他癡呆癥的病理生理學以及臨床診斷、預后和監測提供有價值的見解。了解這些蛋白質如何從中樞進入外周系統，可能是評估癡呆癥患者大腦清除能力受損的關鍵。最近發現淋巴和腦膜淋巴管系統是腦脊液大分子從大腦向外周外排的候選者。在小鼠體內追蹤 CSF 注射的分子，以及在人類中進行造影劑研究表明，這種腦膜淋巴流出物直接排入CLN。上游淋巴外流的破壞可以加速腦 Aβ 斑塊的形成。由于CLN 是顱外的，而且可能是該引流系統中的會聚樞紐。因此，我們預測人類 CLN 采樣可以更好的模擬和監視腦內標志物的變化。

研究方法

文章在兩個人群中使用simoa測量了通過超聲引導細針穿刺（FNA）獲得的CLN 抽吸物和血漿Aβ 40, 42、p-Tau181、GFAP和NFL的濃度。

i）25名自身免疫患者的發現隊列

ii）四名健康志愿者的血漿、CLN和毛細血管血的優化隊列。

研究結果

1．在發現隊列中，所有 5 種生物標志物都存在于所有 CLN 樣本中，但 NfL 只在部分樣本中存在（圖 1A-B）。校正后的 Aβ40 、 Aβ42 和 pTau181 CLN 濃度顯著高于血漿。對于 pTau181，差異幅度最大，CLN中濃度是血漿的65倍。GFAP 和 NfL 未觀察到顯著差異。

在所有 CLN 上清液和所有四名健康參與者的配對血漿中均可檢測到所有生物標志物（圖 1C-D）。與血漿相比，所有 CLN 樣本均顯示更高的 Aβ40 、 Aβ42 、 pTau181 和 GFAP 濃度，以及與毛細血管血中相比，CLN的Aβ40、pTau181 和 GFAP更高。

圖 1 血漿中校正的癡呆液體生物標志物濃度與毛細血管和頸部淋巴結上清液的比較

2. 在動物模型中，隨著年齡的增長，AD 病理相關蛋白向 CLN 的淋巴引流較少。為了在人類中探索這一假設，我們觀察到血漿 pTau181 與年齡呈正相關，但 CLN 水平顯示 pTau181 與年齡呈負相關（圖 2）。

圖 2 頸部淋巴結和血漿p-Tau181濃度與年齡的關系

結論

結果表明，CLN 抽吸物含有目前用作神經退行性生物標志物的蛋白質的濃縮水平。鑒于大腦和 CLN 之間的直接和密切聯系，認為 CLN可能代表腦引流相關物質的來源。FNA 方法由放射科醫生專家進行，并被證明安全又微創，與廣泛使用的腰椎穿刺腦脊液采樣做法相比具有優勢。CLN生物標志物水平也顯示出比血液更高的濃度，并且不受外周組織的污染。因此我們建議 CLN 采樣可以成為一種有價值的補充研究工具，以研究健康和疾病中蛋白質從大腦到外的周清除情況，包括在神經退行性疾病的研究中。

總之，文章提供了獨立驗證的證據來支持 CLN 中存在癡呆液體生物標志物，除 NfL 外，其水平明顯高于循環血漿。此外文章在人類中提供了第一個證據表明，隨著疾病相關生物標志物 pTau181 的年齡增長，腦淋巴引流減少。綜上所述，這些觀察結果可能反映了縱向量化 CLN腦部疾病生物標志物反應體內淋巴引流的潛力，并且在人類實驗醫學研究和早期臨床試驗中評估腦蛋白清除率可能具有重要價值。

文章的局限性包括我們的優化隊列中的人數少、各種自身免疫性神經系統疾病的潛在混淆以及樣品制備的差異。