層析法是根據物質的理化性質不同而建立的分離分析方法。根據層析峰的位置及峰高或峰面積,可以定性及定量。層析法與光學、電學或電化學儀器連用,可檢測出層析后各組份的濃度或質量,同時繪出層析圖。層析儀與電子計算機聯用,可使操作及數據處理自動化,大大縮短分析時間。由于層析法具有分辨率高、靈敏度高、選擇性好、速度快等特點,因此適用于雜質多、含量少的復雜樣品分析,尤其適用于生物樣品的分離分析。近年來,已成為生物化學及分子生物學常用的分析方法。在醫藥衛生、環境化學、高分子材料、石油化工等方面也得到了廣泛的應用。
層析法是目前廣泛應用的一種分離技術。本世紀初植物學家M.Tswett發現并使用這一技術證明了植物的葉子中不僅有葉綠素還含有其它色素?,F在層析法已成為生物化學、分子生物學及其它學科領域有效的分離分析工具之一。
層析法是利用不同物質理化性質的差異而建立起來的技術。所有的層析系統都由兩個相組成:一是固定相,它或者是固體物質或者是固定于固體物質上的成分;另一是流動相,即可以流動的物質,如水和各種溶媒。當待分離的混合物隨溶媒(流動相)通過固定相時,由于各組份的理化性質存在差異,與兩相發生相互作用(吸附、溶解、結合等)的能力不同,在兩相中的分配(含量對比)不同,而且隨溶媒向前移動,各組份不斷地在兩相中進行再分配。與固定相相互作用力越弱的組份,隨流動相移動時受到的阻滯作用小,向前移動的速度快。反之,與固定相相互作用越強的組份,向前移動速度越慢。分部收集流出液,可得到樣品中所含的各單一組份,從而達到將各組份分離的目的。
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