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無血清細(xì)胞凍存液對比傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢

來源:賽爾瑞成(北京)生命科學(xué)技術(shù)有限公司   2025年02月12日 10:11  

細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長期保存的常用方法,其中細(xì)胞凍存液,作為細(xì)胞凍存時必須使用的一種溶液,不僅僅是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存,在細(xì)胞的購買、寄贈、交換和運(yùn)送過程中也起著關(guān)鍵作用,因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。

如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等,從而引起細(xì)胞死亡。而細(xì)胞凍存液就相當(dāng)于細(xì)胞的保護(hù)劑,在凍存細(xì)胞時將細(xì)胞懸浮于凍存液中,可使冰點(diǎn)降低,提高細(xì)胞膜對水的通透性,在緩慢的凍結(jié)條件下,能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞,可以防止或減少冷凍冰晶對細(xì)胞的損傷作用。這樣就使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,在需要時直接復(fù)蘇就可恢復(fù)細(xì)胞活性。

傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液的凍存方法一般是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜),最后才移至液氮罐中進(jìn)行長期的儲存。
(其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量的死亡。)

可見,傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時遇到的問題:

1. 凍存細(xì)胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液,此步可省略)
2. 需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力
3. 含血清,細(xì)胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高
4. 血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異
5. 需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存

CRD10無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。

畫板 1 拷貝 5.png

CRD10無血清細(xì)胞凍存液的凍存方法是:將細(xì)胞凍存懸液(凍存管或孔板)直接放置-80℃冰箱/液氮保存。

可見,CRD10無血清細(xì)胞凍存液相對于傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢有:

1. 即用型,無需現(xiàn)配,直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可
2. 通用型,適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞
3. 無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單
4. 不含血清,大大減少細(xì)胞污染
5. 因不含血清,批次間差異小
6. -80℃冰箱/液氮均可凍存
7. 可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時可節(jié)省篩選過程



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