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土壤硝態氮試劑盒說明書-相關技術文章

來源:北京云肽生物科技有限公司   2025年02月05日 08:33  


土壤硝態氮試劑盒說明書

微量法 100T/96S

 

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:

硝態氮是指硝suan鹽中所含有的氮元素,土壤中的有機物分解生成銨鹽,被氧化后變為硝態氮。土壤中硝態氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,其含量直接關系到作物的產量與品質。

測定原理:

在濃酸條件下,NO3-與水楊酸反應,生成硝基水楊酸,硝基水楊酸在堿性條件下(PH>12)呈黃色,在一定范圍內,其顏色深淺與含量成正比,可比色測定計算得硝態氮含量。

試劑組成和配制:

 

產品名稱

BO6055-100T/96S

Storage

試劑一:粉劑

2

4℃避光

試劑二:液體

50ml

4℃

說明書

一份

試劑一:粉劑×2 支,4℃避光保存。臨用前根據用量每支加 1ml 濃硫酸充分溶解。

自備儀器和用品:

蒸餾水、天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、振蕩儀。

樣本理:

按照土壤質量(g):蒸餾水體積(mL) 15~10 的比例(建議稱取約 0.1g 新鮮土樣,加入 1mL 蒸餾水)加入蒸餾水,置于振蕩儀中振蕩提取 1h25℃,10000g 離心 10min,取上清待測。

測定操作表:

1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 410nm,蒸餾水調零。

2、操作表(EP 管中加入下列試劑):


空白管

測定管

樣本μl


10

蒸餾水μl

10


試劑一μl

20

20

充分混勻,25℃靜置 30min

混勻,渦旋振蕩,使現的沉淀充分溶解,轉移 200uL 至微量石英比色皿/96 孔板中測定 410nm 處吸光值AA=A 測定管-A 空白管。

 

計算公式:

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線:y=0.0156x+0.0073R2=0.9997

NO3N 含量(mg/kg 鮮重)=A-0.0073÷ 0.0156÷W÷V 樣總) =64.1×A-0.0073÷W V 樣總:加入提取液體積,1mlW:樣本質量,g

b.  96 孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y=0.0078x+0.0073R2=0.9997

NO3Nmg/kg 鮮重)=A-0.0073÷ 0.0078÷W÷V 樣總)=128.2×A-0.0073÷W V 樣總:加入提取液體積,1mlW:樣本質量,g

注意事項:

1、硝酸根不為土壤膠體吸附,且易溶于水,很容易在土壤內部移動,所以測定此指標時應注意采樣深度一致。

2、土壤經風干或者烘干很容易引起 NO3N 的變化,所以最好采用新鮮土壤進行測定,以準確反映該指標含量。

3、試劑一配制好后盡快使用,4℃可保存一周。

4、試劑一和試劑二均具有強腐蝕性,操作時需做好防護措施。

5、*低檢限為 100μg/kg


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