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土壤總磷/有機磷/無機磷含量測定試劑盒說明書

來源:北京云肽生物科技有限公司   2025年02月05日 08:29  


土壤總磷/有機磷/無機磷含量測定試劑盒說明書

分光光度 50 /48 

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:

土壤總磷包括有機磷和無機磷,其中無機磷能夠直接被植物利用。土壤有機磷經過礦化分解而轉化為無機磷。同時測定土壤總磷、有機磷和無機磷,可以全面反映土壤磷營養狀況。

測定原理:

利用鉬藍法定磷。取一份土樣,通過浸提法測定土壤無機磷含量;另外取一份土樣,經高溫灼燒后,土壤有機磷轉化為無機磷,測得土壤總磷含量;總磷含量減去無機磷含量,即可計算??有機磷含量。

試劑組成和配制:

 

產品名稱

BO6050-50T/48S

Storage

試劑一:液體

1

4℃

試劑二:液體

1

4℃

試劑三:粉劑

1

4℃避光

標準品:液體

1

4℃

說明書

一份

試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。臨用前用蒸餾水稀釋 10 倍后再用。

試劑三:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前配制,加入 20 ml 蒸餾水,充分溶解后加入 10 ml 試劑二,混勻。

標準品:液體×1 支,20 μ mol/L 無機磷標準品,4℃保存。

自備儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、可調式水浴鍋,分析天平、可調式移液器、550℃高溫電爐,1ml 玻璃比色皿、蒸餾水、100 目篩子(可更小)。

土壤不同形態磷提取:

1. 無機磷:稱取通過 100 目篩子的風干土樣 0.1g,轉移到 10 ml 離心管,加入 10ml 試劑一,震蕩混勻,然后置于 45℃水浴 1h8000g25℃離心 10min,取上清液一,用于無機磷含量測定。

2. 總磷提取:取通過 100 目篩子的風干土樣,550℃灼燒 1h,冷卻后稱取約 0.1g,轉移到 10 ml 離心管,加入 10ml 試劑一,震蕩混勻,然后置于 45℃水浴 1h8000g25℃,離心 10min,取上清液二,用于總磷含量測定。

測定步驟:

1. 分光光度計預熱 30 min,調節波長到 660 nm,蒸餾水調零。

2. 打開水浴鍋,調節溫度到 40℃

3. 空白管:取EP 管,依次加入 500μl 蒸餾水,500μl 試劑三,混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,記為A 空白管。

4. 標準管:取EP 管,依次加入 50μl 標準液,450μl 蒸餾水,500μl 試劑三,混勻后置于 40℃水浴保 10min,室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,記為A 標準管。

5. 測定管:取 EP 管,依次加入 50μl 上清液一或者上清液二,450μl 蒸餾水,500μl 試劑三,混勻后置 40℃水浴保溫 10min,室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,記為A 測定管。

注意事項:

1、空白管和標準管只需測定一次。

2、試劑三配制過程中,可能會產生黑色固體,其不影響結果,注意吸取時不要將黑色固體吸入。

土壤磷含量計算:

1. 土壤無機磷含量(μmol /g=[C 標準液×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]×V ÷W=0.2×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)÷W

C 標準液:20 μmol/L W:土壤樣品質量,g V 總:上清液一總體積,10 ml=0.01 L

2. 土壤總磷含量(μmol /g 干重)=[C 標準液×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]×V 

÷W=0.2×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)÷W

C 標準液:20 μmol/LV 標準液:50μl=0.05 mlW:土壤樣品質量,gV 總:上清液二總體積,10 ml=0.01 L

3. 土壤有機磷(μmol /g=土壤總磷-土壤無機磷


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