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Csf1r(小鼠)ELISA試劑盒測定原理&樣本準備指南

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2025年01月14日 16:05  

集落刺激因子1受體(CSF1R),也稱為M-CSFRCD115,是一種細胞表面蛋白,在人類中由CSF1R基因編碼。該基因位于5號染色體的長臂(5q32)上,位于Crick(負)鏈。編碼的蛋白是一種酪氨酸激酶跨膜受體,屬于酪氨酸蛋白激酶的CSF1/PDGF受體家族。編碼的蛋白是一種單次跨膜I型膜蛋白,作為集落刺激因子1的受體,這是一種控制巨噬細胞產生、分化和功能的細胞因子。CSF1R及其配體集落刺激因子1在乳腺腺體的發育中起著重要作用,可能參與乳腺腺體癌變的過程。

 

Csf1r(小鼠)ELISA試劑盒是一種夾心酶免疫測定法,用于定量測量小鼠Csf1r

 

艾美捷Csf1r(小鼠)ELISA試劑盒

貨號:KA3348

校準范圍:62.54000皮克/毫升

適用樣本:細胞培養上清液、細胞裂解液、血漿(EDTA、肝素)、血清。

樣本體積:100微升

標記:HRP偶聯

檢測方法:比色法

法規狀態:僅限研究使用(RUO

反應性:小鼠

應用:定量

儲存說明:在4℃下可儲存6個月,在-20℃下可儲存12個月。避免多次凍融循環。

Entrez GeneID12978

基因符號:Csf1r

基因別名:AI323359CD115CSF-1RCsfmrFim-2FmsM-CSFR

僅限研究使用(RUO

 

Csf1r(小鼠)ELISA試劑盒測定原理:

Csf1r(小鼠)ELISA試劑盒是一種固相免疫測定法,專門設計用于測量小鼠Csf1r。該試劑盒使用預包被有針對Csf1r特異性抗體的96孔條板。檢測抗體是針對Csf1r的生物素化抗體。捕獲抗體是大鼠來源的單克隆抗體,檢測抗體是山羊來源的多克隆抗體。試劑盒包含重組小鼠Csf1r,免疫原:表達系統為標準:NS0;免疫原序列:A20-S511。試劑盒已通過即用型試劑進行了分析驗證。要測量小鼠Csf1r,將標準品和樣本加入孔中,然后加入生物素化的檢測抗體。用PBSTBS緩沖液洗滌孔,然后加入鏈霉親和素-生物素-過氧化物酶復合物(ABC-HRP)。用PBSTBS緩沖液洗去未結合的ABC-HRP,然后加入TMBTMBHRP的底物,會被催化產生藍色產物,加入酸性終止液后變為黃色。黃色產物在450納米處的吸光度與樣本中的小鼠Csf1r成線性比例。使用酶標儀讀取每個孔中黃色產物的吸光度,并將樣本孔的讀數與標準曲線進行對比,以確定樣本中小鼠Csf1r的濃度。

 

樣本準備:

? 樣本準備和儲存

這些樣本收集說明和儲存條件僅供參考,樣本穩定性尚未評估。

樣本稀釋比例應通過預實驗確定(對樣本進行系列稀釋,查看哪種稀釋比例的結果理想,接近標準范圍的中間值)。一般來說,高濃度樣本可以稀釋1:100,中等濃度樣本1:10,低濃度樣本1:2或直接使用。

• 細胞培養上清液:通過離心清除顆粒,立即測定或在-20℃儲存樣本。

• 血清:使用血清分離管(SST),讓血清在室溫下凝固約四小時。然后,以大約1000 x g的離心力離心15分鐘。立即測定或在-20℃儲存樣本。

• 血漿:使用肝素或EDTA作為抗凝劑收集血漿。以大約1000 x g的離心力離心15分鐘。立即測定或在-20℃儲存樣本。

*注意:重要的是不要使用上述以外的抗凝劑處理血漿,因為其他抗凝劑可能會阻斷抗體結合位點。

• 細胞裂解液:裂解細胞,確保沒有可見的細胞沉淀。以大約10000 x g的離心力離心細胞裂解液5分鐘。收集上清液。

• 樣本收集注意事項

建議樣本制備后立即使用。

避免所有樣本的反復凍融循環。

如果打算使用上述未列出的樣本類型與試劑盒一起使用,建議客戶進行驗證實驗,以確保結果的可靠性。

由于化學干擾,使用化學裂解緩沖液制備的組織或細胞提取樣本可能會導致結果不準確。

由于細胞活性、細胞數量或采樣時間等因素,細胞培養上清液樣本可能無法被試劑盒檢測到。

在進行測定之前,樣本應恢復至室溫(18-25℃),無需額外加熱。

在使用測定之前,應預測樣本濃度。如果樣本濃度不在標準曲線范圍內,用戶必須確定其特定實驗的最佳樣本稀釋比例。

? 樣本稀釋指南

用戶需要估計樣本中目標蛋白的濃度,并使用適當的稀釋因子,使稀釋后的目標蛋白濃度落在標準曲線的O.D.值范圍內。使用提供的稀釋緩沖液稀釋樣本。每種樣本類型都需要進行稀釋系列的預實驗。必須將樣本與樣本稀釋液充分混合。

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標準曲線僅用于演示,不應用于計算未知量。每次進行測定時,應生成標準曲線。


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