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藥典委中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ檢查指導(dǎo)原則已公示 島津解決方案來助力

來源:島津(上海)實(shí)驗(yàn)器材有限公司 SGLC   2024年12月17日 13:13  

導(dǎo)語

 

馬兜鈴酸(AAs)為硝基菲類有機(jī)酸類化合物。這類有機(jī)化合物天然存在于諸如馬兜鈴屬及細(xì)辛屬等馬兜鈴科植物中。其中馬兜鈴酸Ⅰ是馬兜鈴屬植物中毒性較強(qiáng)的成分。另有研究發(fā)現(xiàn),不但馬兜鈴酸具有腎毒性,其代謝產(chǎn)物馬兜鈴內(nèi)酰胺同樣具有腎毒性。

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中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ檢查指導(dǎo)原則標(biāo)準(zhǔn)草案發(fā)布

2024年12月6日,國家藥典委發(fā)布“關(guān)于中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ檢查指導(dǎo)原則標(biāo)準(zhǔn)草案的公示”。

 

 

 

正文

指出馬兜鈴酸類物質(zhì)成分的種類及藥材類別,提到本指導(dǎo)原則適用于中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ檢查,提供某中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ檢查示例方法。

 

 

 

附注

1、中成藥中馬兜鈴酸Ⅰ的測定屬于毒性成分檢査范疇,測定方法可以參考本指導(dǎo)原則的方法,亦可對本方法進(jìn)行合理優(yōu)化,但均需參照《中國藥典》2020 年版四部 9101分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則進(jìn)行驗(yàn)證。建議采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對中成藥中馬兜鈴酸I進(jìn)行檢查。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立必要的質(zhì)控手段,保證測定結(jié)果準(zhǔn)確。

 

2、根據(jù)各品種馬兜鈴酸Ⅰ的含量情況,及儀器靈敏度試驗(yàn)確定適宜的供試品取樣量及稀釋倍數(shù)。示例中成藥日服用量40g。但馬兜鈴酸毒性不等同于含有此類成分的中藥材、飲片及制劑的毒性,各生產(chǎn)單位及藥品上市許可持有人應(yīng)加強(qiáng)研究,制定合理的限度。

 

3、本方法提供的色譜條件、監(jiān)測離子對測定條件等為參考條件,各實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)樣品處方干擾情況和所配置儀器的具體情況做適當(dāng)調(diào)整、優(yōu)化。

 

4、進(jìn)行樣品測定時,如檢出色譜峰的保留時間與對照品一致,在扣除背景后的質(zhì)譜圖中,所選擇的 2 個監(jiān)測離子對均出現(xiàn),且所選擇的監(jiān)測離子對峰面積比與濃度相當(dāng)?shù)膶φ掌返谋O(jiān)測離子對峰面積比一致(相對比例 >50%,允許+20%偏差:相對比例20%~50%,允許+ 25%偏差:相對比例10 %~20 %,允許+30%偏差;相對比例<10%,允許±50%偏差)則可判斷樣品中存在馬兜鈴酸Ⅰ。如果不能確證,選用其他監(jiān)測離子對重新進(jìn)樣確證或選用其他檢測方式的分析儀器來確證,如選用高分辨質(zhì)譜等手段確證。

 

5、根據(jù)待測樣品處方和劑型特點(diǎn)可采用更為適宜的供試品溶液制備方法。基質(zhì)效應(yīng)是干擾分析結(jié)果準(zhǔn)確性的重要因素之一,在分析方法考察中須高度重視。必要時,應(yīng)建立適宜的供試品溶液凈化方法。

島津解決方案

SHIMADZU

 

針對于標(biāo)準(zhǔn)草案的發(fā)布及行業(yè)聚焦中成藥中馬兜鈴酸檢測的研究,島津快速應(yīng)對,為馬兜鈴酸的檢測及研究提供整體解決方案。

 

 

分析儀器

 

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耗材

• 馬兜鈴酸前處理專用小柱:SHIMSEN Styra AAs (60mg/3ml 50pcs,P/N:D380-00877-39)

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• 馬兜鈴酸分析色譜柱:Shim-pack Velox C18(1.8μm,2.1*100mm;P/N:227-32007-03)

• 馬兜鈴酸類物質(zhì)異構(gòu)體分析柱:Shim-pack Velox PFPP(1.8μm 2.1x100mm;P/N:R227-32019-03)

圖片

核殼技術(shù)填料,更高分離度,更快分析結(jié)果

? 更高靈敏度

? 優(yōu)異的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性,確保數(shù)據(jù)的可靠性

 

 

 

 

 

應(yīng)用案例 1  

清肺止咳丸中馬兜鈴酸Ⅰ的檢測

1、 靈敏度與專屬性

 

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2、線性范圍

圖片

馬兜鈴酸Ⅰ校準(zhǔn)曲線

3、精密度實(shí)驗(yàn)

圖片

0.4ng/mL和1ng/mL 重復(fù)性色譜圖

4、實(shí)際樣品檢測和回收率實(shí)驗(yàn)

圖片

樣本實(shí)測:取市售清肺止咳丸樣品按本方法測定,檢測到馬兜鈴酸Ⅰ,含量為 1.35 ng/g(0.054 ng/mL)。準(zhǔn)確度考察:在樣品中分別添加 10 ng/g(0.4ng/ml)濃度水平和 25 ng/g(1ng/mL)濃度水平馬兜鈴酸進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),回收率分別為 105.4%和114.9%。

 

 

 

 

應(yīng)用案例 2  

復(fù)雜樣品人參再造丸中馬兜鈴酸Ⅰ的檢測

1、樣品凈化

通過對SHIMSEN Styra AA小柱進(jìn)行活化平衡、上樣淋洗、洗脫,最后加水定容至5 mL,過0.22 μm濾膜,供 LC-MS/MS 分析。通過SHIMSEN Styra AA小柱的凈化,排除目標(biāo)峰旁的雜質(zhì)峰,也可消除基質(zhì)干擾帶來的離子比率的偏差。

image.png

 

2、 不同色譜柱的響應(yīng)差異對比圖

Shim-pack Velox C18的響應(yīng)是島津前一代色譜柱的2.5倍(同等實(shí)驗(yàn)室條件下),對比如下圖

image.png

3、加標(biāo)回收率結(jié)果

圖片

以上案例,如需要詳細(xì)了解,可聯(lián)系島津獲取全文。

 

 

 

 

 

應(yīng)用案例 3  

UHPLC-MS/MS測定九味羌活顆粒中7個馬兜鈴酸類成分

圖片
圖片

7個馬兜鈴酸類成分的MRM色譜圖

 

難點(diǎn)解決:異構(gòu)體分離

由于測定的馬兜鈴酸類成分的結(jié)構(gòu)比較類似,尤其是AA-Ⅰ與AA-Ⅲ結(jié)構(gòu)極其相似,因此存在相同結(jié)構(gòu)碎片,在AA-Ⅲ的定量通道中AA-Ⅰ也會出現(xiàn)色譜峰,若2個結(jié)構(gòu)很相似的成分在色譜分離時分離不開,在質(zhì)譜進(jìn)行定量分析時可能會出現(xiàn)假陽性結(jié)果。因此,本研究選用選擇性更強(qiáng)、對同分異構(gòu)體有良好分離效果的Shim-pack Velox PFPP色譜柱。

圖片

1.馬兜鈴酸Ⅰ(馬兜鈴酸 A);2. 馬兜鈴酸Ⅱ(馬兜鈴酸 B);3. 馬兜鈴酸Ⅲ

 

 

 

參考文獻(xiàn):

[1]聶黎行,王馨平,李靜,等.中藥材(飲片)中馬兜鈴酸的含量分析及初步風(fēng)險評估[J].中國藥物警戒,2023,20(05):553-559.DOI:10.19803/j.1672-8629.20220175.

 

 

 

撰稿人:豐偉剛

 

 

 

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