正常原代細(xì)胞在培養(yǎng)過程中只能增殖有限數(shù)量的細(xì)胞群倍,之后就會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)停滯和衰老表型。細(xì)胞衰老是一種穩(wěn)定的細(xì)胞周期停滯狀態(tài),衰老細(xì)胞的特點(diǎn)是不可逆的G1生長(zhǎng)抑制,涉及抑制驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期進(jìn)程的基因以及細(xì)胞周期抑制因子(如p16INK4a、p53及其轉(zhuǎn)錄靶點(diǎn)p21CIP1)的上調(diào)。它們對(duì)有絲分裂誘導(dǎo)的增殖具有抵抗力,并且形態(tài)上細(xì)胞也會(huì)呈現(xiàn)異常增大和扁平狀。細(xì)胞衰老可以通過檢測(cè)衰老細(xì)胞的標(biāo)志物來檢測(cè),如酸性衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)。
Cell Biolabs提供3種檢測(cè)SA-β-Gal的試劑盒,為細(xì)胞衰老相關(guān)研究助力。
● 96-Well Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal Activity, Fluorometric Format)
貨號(hào) | CBA-231、CBA-231-5 |
規(guī)格 | 120 assays、5 x 120 assays |
檢測(cè) | 熒光酶標(biāo)儀 |
組成 | 2 x Cell Lysis Buffer 2 x Reaction Buffer SA-β-Gal Substrate (20x) Stop Solution |
該試劑盒通過熒光底物測(cè)量SA-β-Gal的活性,提供了一種易于使用和高效的方法來確定細(xì)胞衰老。具體產(chǎn)品信息詳見說明書。
● Quantitative Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal, Fluorometric)
貨號(hào) | CBA-232、CBA-232-5 |
規(guī)格 | 10 assays (35 mm dishes)、5 x 10 assays (35 mm dishes) |
檢測(cè) | 熒光顯微鏡/流式細(xì)胞術(shù) |
組成 | Cell Pretreatment Solution (1000x) SA-β-Gal Substrate (200x) |
該定量檢測(cè)試劑盒使用熒光底物來測(cè)量SA-β-Gal活性。這種化合物是β-半乳糖苷酶的一種膜滲透性非熒光底物,它在半乳糖殘基水解后會(huì)發(fā)出綠色熒光,并保留在細(xì)胞內(nèi)。與使用X-gal 的傳統(tǒng)細(xì)胞化學(xué)測(cè)定相比,使用熒光底物大大提高了測(cè)定的靈敏度。此外,無(wú)毒的熒光底物還可以通過流式細(xì)胞儀研究活細(xì)胞,對(duì)SA-β-Gal活性進(jìn)行定量。每個(gè)試劑盒可在35 mm培養(yǎng)皿中進(jìn)行多達(dá)10個(gè)assay。具體產(chǎn)品信息詳見說明書。
● Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal Staining)
貨號(hào) | CBA-230、CBA-230-5 |
規(guī)格 | 50 assays、5 x 50 assays |
檢測(cè) | 光學(xué)顯微鏡 |
組成 | 100x Fixing Solution Staining Solution A Staining Solution B Staining Solution C Staining Solution D X-gal Solution |
該試劑盒利用SA-β-Gal催化X-gal的水解,在衰老細(xì)胞中 產(chǎn)生藍(lán)色,將結(jié)果可視化。每個(gè)試劑盒都提供足量的試劑,可在35mm的培養(yǎng)皿中進(jìn)行50個(gè)assay。具體產(chǎn)品信息詳見說明書。
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