入/核/電/轉Lonza Nucleofector

超高引用值得信賴

非病毒轉染

Nucleofector電轉技術

細胞轉染有許多不同的方式，常用于實驗室的就是脂質體轉染、病毒轉染以及電穿孔法。

傳統(tǒng)的電穿孔技術需要摸索步驟進行優(yōu)化，轉染位置為胞質，細胞毒性大，轉染效率難以得到保證。但Lonza公司對電穿孔技術進行了優(yōu)化，通過配合高效率的細胞轉染液、預置的優(yōu)化好的轉染程序，直接將外源基因導入目標細胞，實現(xiàn)更高轉染效率、更高細胞存活率，最快在轉染2小時后就能觀察到轉染基因的蛋白表達。

原理與優(yōu)勢

Nucleofector技術原理：高效的非病毒的DNA轉運，適用于原代細胞或是細胞系，可直接轉運入細胞核。

主要優(yōu)勢：

· 基因轉染效率高

· 轉染與細胞分裂無關

· 可實現(xiàn)非分裂細胞的轉染，如神經元細胞

· 更快的基因表達

· 通用性：可轉染質粒DNA，DNA單鏈，mRNA或是siRNA，可適用于原代細胞或是細胞系。

不同轉染模塊

Core Unit：核心模塊，控制系統(tǒng)，能夠加載程序，實現(xiàn)細胞轉染功能。

X Unit：能夠實現(xiàn)懸浮細胞的轉染，可以以20ul，100ul的體系進行轉染。

Y Unit：能夠實現(xiàn)貼壁細胞的轉染，可直接在24孔板內進行轉染。

96-well Unit：可在96孔板內進行檢測，可應用于原代細胞以及難轉染細胞。

實驗步驟簡單

Step 1：將目標細胞從培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中收集起來。

Step 2：將細胞與轉染試劑、需轉入的物質（DNA或siRNA）混勻，并轉入電極杯中。

Step 3：選擇合適的程序，將電極杯或電極條插入儀器中，按下Start按鈕。

Step 4：用培養(yǎng)基沖洗，將細胞沖洗下來

Step 5：將沖洗后的培養(yǎng)基轉移至培養(yǎng)皿中，在一定時間后即可檢測轉染效率。

基因表達快速

TMR標記的DNA表達eGFP的質粒轉染新生兒皮膚成纖維細胞（NHDF-neo)，兩小時后用 3.5%PFA固定，共聚焦顯微鏡可觀察到GFP蛋白在細胞核內表達。

05

應用領域多樣

免疫、腫瘤、代謝、神經等研究領域的不同細胞，難以進行轉染的細胞、無法分裂的細胞，都可以實施轉染。

06提供多種工具

從轉染方法到細胞培養(yǎng)知識，不同的轉染細胞種類，適用的不同轉染方法，都能在Lonza找到答案。