雙特異性抗體

新型療法，方興未艾

雙特異性抗體（bsAbs）作為一種創新的治療方式，在制藥領域正迅速嶄露頭角。雖然單克隆抗體（mAbs）在過去幾十年里一直是生物制劑領域的主導力量，但bsAbs通過同時針對兩種不同的抗原，提供了一種全新的治療機制。這種能力開辟了新的治療途徑，尤其是在癌癥免疫治療和自身免疫性疾病等領域顯示出巨大潛力。

從2021年到2023年，雙特異性抗體的批準數量顯著增加。在2021年之前，全球僅有三種bsAb獲得批準。然而，從2021年到2023年，新增了11種bsAb療法，使得獲批的bsAb療法名單不斷擴充（參見圖1）。

圖1.過去幾年中，經監管機構批準并投放市場的bsAb數量大幅增加[1]。

然而，開發這些復雜分子帶來了挑戰，特別是在確保細胞株開發 (CLD) 期間的質量和產量方面。傳統的CLD工作流程通常會忽略測量關鍵的質量屬性，例如正確的異二聚體濃度，或者直到克隆后數月才進行測量。最近的一項行業調查發現，只有12%的CLD團隊在將克隆推進到攪拌培養階段之前評估產品質量[2]。這種延遲的質量評估增加了推進劣質克隆的風險，導致成本增加和資源浪費。

Beacon®平臺：CLD的游戲規則改變者

Beacon®平臺已成為應對這些挑戰的先進集成解決方案。其核心技術利用光電定位 (OEP) 來操縱細胞和微珠，從而將單克隆精確地移動進入NanoPen®納升小室中進行實時分析。

這些NanoPen®小室是平臺的核心。每個小室在微尺度下運行，可容納不到兩納升的液體。如此小的體積創造了一個高度濃縮的環境，可以更快、更準確地檢測分泌抗體，包括bsAbs。例如，傳統微孔板中需要數周時間的測量，在Beacon®系統上可以在幾小時到幾天內完成。

此外，該平臺還可精確控制流體條件（例如pH、溫度和培養基成分），從而更接近生物反應器環境。NanoPen®小室層流特性可確保擴散（而不是湍流混合）驅動分子的交換，從而實現高度可控且可靠的測定[3]。

Beacon®平臺測定雙特異性抗體

Beacon®平臺的主要優勢之一是能夠高精度地篩選bsAbs。對于需要特定結合率（例如兩個不同結合域的比率為1:1）的雙特異性分子，盡早識別具有正確異二聚體濃度的克隆至關重要。使用Beacon®平臺，您可以測量擴散梯度 (DiGr) 信號，該參數與抗體產率直接相關。

與GSK和Incyte等者的合作證明了這種方法的有效性。在與GSK的一項研究中，使用 Beacon®平臺測量了13個不同的克隆，并與高效液相色譜 (HPLC) 分析進行了比較。結果顯示相關系數為0.99，證實了該平臺雙特異性測量的準確性。

圖2. HPLC分析證實，使用雙特異性異二聚體測定法選擇的克隆分泌出預期的異二聚體百分比。克隆按顏色分為四個簇，代表不同純度的雙特異性異二聚體分子。A) 抗原測定的散點圖突出顯示了為 AMBR 發酵選擇的克隆的分布（三角形）。綠色虛線表示校準后的Pen Score比率為1。B) 校準后的Pen Score比率與發酵培養物測量的異二聚體百分比的散點圖。

同樣，在與Incyte的合作中，結果也反映了這些出色的預測結果。為了進一步了解這些功能，Incyte 的Shu Wang博士在最近的網絡研討會上分享了深入的分析，為bsAb測量提供了寶貴的觀點。

SpotLight試劑：簡化bsAb檢測

2023年，布魯克細胞分析事業部推出了SpotLight Human Lambda試劑，進一步簡化了Beacon®平臺上的bsAb測量。這一新增功能允許使用布魯克細胞分析公司提供的現成試劑對具有Kappa和Lambda輕鏈的抗體進行bsAb檢測[4]（圖3）。

圖 3. SpotLight Human Lambda拓寬SpotLight試劑列表，讓bsAbs的檢測更加方便。使用SpotLight Human Kappa和Lambda試劑的方法無需開發定制試劑來結合每條輕鏈，而是為具有兼容分子設計的 bsAbs測量提供了現成的解決方案。

通過使用SpotLight Human Kappa和SpotLight Human Lambda試劑，用戶可以進行比率分析以確定每個結合域的濃度。這種早期篩選可以在單細胞克隆后的幾天內識別出產量最高的克隆，替代通常需要數周或數月的傳統工作流程。

結論

Beacon®平臺正在改變雙特異性抗體的開發。通過加快從轉染到最佳克隆鑒定的時間線，研究人員現在可以在過程早期測量異二聚體濃度等關鍵質量屬性。此功能不僅降低了成本和開發時間，還提高了開發高質量、高產克隆的可能性，使 Beacon®平臺成為不斷發展的雙特異性抗體治療領域工具。