cAMP是一種普遍存在于所有哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的第二信使。這種信使調(diào)節(jié)各種激素、神經(jīng)遞質(zhì)、生長因子、細(xì)胞因子和其他配體受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。cAMP磷酸二酯酶是水解和截?cái)嘣醋允荏w激活的cAMP信號(hào)傳導(dǎo)的唯1途徑。cAMP水解活性由一個(gè)相當(dāng)大的多酶家族提供，該家族具有D特的細(xì)胞內(nèi)定位和調(diào)節(jié)特性。在各種PDE家族（PDE1-PDE11）中，PDE4有4個(gè)基因（PDE4A、PDE4B、PDE4C、PDE4D）以多剪接變體形式表達(dá)。

PDE4活性測量需要兩步反應(yīng)，在第一步反應(yīng)中，cAMP被PDE活性水解成非環(huán)狀。通過使PDE源變性或加入PDE4選擇性抑制劑來停止該反應(yīng)，然后通過第二步酶反應(yīng)將AMP轉(zhuǎn)化為腺苷達(dá)到平衡。由于腺苷是中性的，因此通過離子交換色譜法用電荷分離cAMP或AMP。為了避免其他PDE的背景貢獻(xiàn)，該PDE測定在針對(duì)PDE4優(yōu)化的底物濃度下進(jìn)行。PDE4酶活性與第一反應(yīng)中形成的腺苷成正比。

PDE4活性測量在2-3小時(shí)內(nèi)提供可重復(fù)的結(jié)果。該試劑盒提供足夠的試劑，與內(nèi)部控制一起處理50或100個(gè)樣本。試劑盒試劑在推薦條件下儲(chǔ)存可穩(wěn)定6個(gè)月。該試劑盒的內(nèi)容物必須按照瓶子標(biāo)簽和規(guī)格表上的指示在不同溫度下儲(chǔ)存。

艾美捷FabGennix-PDEase套件（PDEase-100）組成成分：

孵育緩沖液試劑A：5毫升

孵育緩沖液試劑B：5毫升

孵育緩沖液試劑C：5毫升

PDE底物緩沖液D：10毫升

PDE底物：2倍200微升

抑制劑緩沖液：50毫升

第二酶源（10倍濃縮液）: 2倍250微升

樹脂懸浮液（10倍濃縮液）：100毫升

PDE4酶對(duì)照：1倍200微升

文獻(xiàn)參考：

Joshi, Rashika, et al. "Phosphodiesterase (PDE) inhibitor torbafylline (HWA 448) attenuates burn-induced rat skeletal muscle proteolysis through the PDE4/cAMP/EPAC/PI3K/Akt pathway." Molecular and cellular endocrinology 393.1 (2014): 152-163. PMID24973766

Al-Tawashi, Azza, and Chris Gehring. “Phosphodiesterase Activity Is Regulated by CC2D1A That Is Implicated in Non-Syndromic Intellectual Disability.” Cell Communication and Signaling?: CCS 11 (2013): 47. PMC3704924

Gobejishvili, Leila et al. “Rolipram Attenuates Bile Duct Ligation–Induced Liver Injury in Rats: A Potential Pathogenic Role of PDE4.” The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 347.1 (2013): 80–90. PMC. PMC3781411

Gobejishvili, Leila et al. “S-Adenosylmethionine Decreases Lipopolysaccharide-Induced Phosphodiesterase 4B2 and Attenuates Tumor Necrosis Factor Expression via cAMP/Protein Kinase A Pathway.” The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 337.2 (2011): 433–443.  PMC3083110

Li, Yuting et al. “Regulation of Amygdalar PKA by β-Arrestin-2/phosphodiesterase-4 Complex Is Critical for Fear Conditioning.”Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 106.51 (2009): 21918–21923. PMC2799795

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