2013  TCR-T療法的開拓^[1]

不同突變的 MAGE A3 TCR-T（a3a，a3b,b2a,b2b等）細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn): 通過 Incucyte®平臺檢測凋亡細(xì)胞數(shù)。以HLA - A * 01 + （括號中顯示為 +/++/+++ HLA-A*01 狀態(tài)）不同腫瘤細(xì)胞為靶細(xì)胞，將其與轉(zhuǎn)導(dǎo)的TCR-T細(xì)胞共培養(yǎng)，并檢測細(xì)胞凋亡情況，以此評估T細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷效果。

iCell殺傷實(shí)驗(yàn)：將iCell心肌細(xì)胞與a3a和野生型轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞共培養(yǎng)，使用Incucyte®的相差圖像觀察iCell在24小時后的存活情況，以評估a3a 轉(zhuǎn)導(dǎo)的T對iCell的殺傷作用。iCells 會被 a3a轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞殺死，但不會被野生型轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞殺死。提示表達(dá)高親和力MAGE A3 TCR的T細(xì)胞注入患者體內(nèi)可能會對心臟組織產(chǎn)生致命毒性。

   2020 CAR-M創(chuàng)始文章^[2]

CAR-M對腫瘤細(xì)胞的吞噬和殺傷作用

Incucyte®結(jié)果：h圖，pH依賴性染料和Her2標(biāo)記的微球被UTD（未轉(zhuǎn)導(dǎo)）或CAR-M吞噬的情況，說明CAR19ζ巨噬細(xì)胞以一種抗原特異性的方式吞噬攜帶抗原的腫瘤細(xì)胞。K圖,殺傷動力學(xué)試驗(yàn)，使用Incucyte®評估在10:1的E:T比率下，UTD或CAR-M對SKOV3細(xì)胞的殺傷動力學(xué)。CAR-M以一種劑量和時間依賴性的方式根除了SKOV3。

  2022 TCR-T突破性發(fā)現(xiàn)^[3]

Incucyte®數(shù)據(jù)：人黑色素瘤細(xì)胞（nRFP-M407）在加入未轉(zhuǎn)導(dǎo)或共轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞（ho2R–NYESO1-TCR或ho9R–NYESO1-TCR）后的殺傷效力。每72小時加入新的黑色素瘤細(xì)胞，并使用Incucyte®系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測。ho9R–NYESO1-TCR可以對腫瘤細(xì)胞連續(xù)殺傷，而不衰竭。

   2024 NK細(xì)胞凍不得，但是有辦法！^[4]

Incucyte®結(jié)果：e圖，使用K562細(xì)胞作為靶細(xì)胞，檢測NK細(xì)胞在冷凍保存前后的細(xì)胞毒性。結(jié)果表明，冷凍保存后的NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性顯著低于非冷凍保存的NK細(xì)胞。b圖，Incucyte®Caspase-3/7染料來指示早期凋亡。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，從解凍后4小時開始，冷凍保存的NK細(xì)胞中caspase-3/7激活水平高于非冷凍保存的NK細(xì)胞，并在9小時后迅速上升至平臺期。c圖使用Incucyte® Cytox NIR染料來指示細(xì)胞死亡，實(shí)驗(yàn)從解凍后12小時開始檢測到細(xì)胞死亡，并且在剩余的時間內(nèi)細(xì)胞死亡數(shù)量逐漸增加。表明冷凍保存的NK細(xì)胞在解凍后會經(jīng)歷程序性細(xì)胞死亡，而不是由于急性物理損傷導(dǎo)致的壞死。

Incucyte®結(jié)果：使用IL-15+IL-18預(yù)處理的NK細(xì)胞在冷凍保存前后的細(xì)胞殺傷結(jié)果表明經(jīng)過IL-15+IL-18預(yù)處理的NK細(xì)胞，其細(xì)胞毒性在冷凍前后保持相似。說明IL-15+IL-18預(yù)處理對NK細(xì)胞的保護(hù)作用，促進(jìn)NK細(xì)胞的恢復(fù)功能。