蘇木素(Hematoxylin)通常與伊紅(Eosin)聯合用于染色,即 HE 染色。蘇木素經氧化后生成蘇木精,是一 種堿性染料,組織學中用于細胞核的染色。其染色基本原理在于,細胞核內染色質主要成分 DNA 帶負電荷, 呈酸性,容易與呈堿性、帶正電荷的蘇木精染料結合而被染色。
使用方法
自備蘇木素分化液(推薦 78NB10002)、蘇木素返藍液(推薦 78NB10003)、二甲苯、梯度乙醇、無水乙醇、中性樹 膠等。
1.樣本前處理
(1) 對于石蠟切片:切片依次經二甲苯脫蠟 10 min,更換新鮮的二甲苯脫蠟 10 min,無水乙醇 5min,新 鮮無水乙醇 5 min,90%乙醇 5 min,75%乙醇 5 min,自來水洗。
(2) 對于冰凍切片:-20℃保存的冰凍切片需靜置 5-10 min 恢復至室溫。
2. 蘇木素染色
上述處理好的切片,直接進入蘇木素染液染色 3-5 min,自來水洗;再經蘇木素分化液 2-5 s,自來水 洗;蘇木素返藍液返藍 2-5 s,自來水沖洗。鏡下觀察細胞核呈藍色,組織背景近乎無色。然后切片依次經 70%、80%、95%、100%乙醇脫水,各 3 min 左右。切片再經新鮮無水乙醇脫水 3 min,二甲苯透明 5 min, 更換新鮮的二甲苯再透明 5 min。最后用中性樹膠封片。 注:如果用于免疫組化等染色后的復染,請在其他染色完成后再進行伊紅染色。
1.蘇木素染液可重復使用多次,每次用完后需密封保存,防止有效成分揮發。當組織或細胞著色明顯偏 淺或顏色異常時請更換新的染液。
2. 染液表面有少量氧化膜為正常現象,不影響染色結果。如果染液表面出現大量氧化膜,建議更換新的 蘇木素染液。
3. 操作時請穿實驗服,佩戴一次性手套。
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