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疏水色譜柱的優(yōu)點(diǎn)與局限性

來源:東曹(上海)生物科技有限公司   2024年08月14日 14:13  
  疏水色譜柱采用具有適度疏水性的填料作為固定相,以含鹽的水溶液作為流動(dòng)相。在高濃度鹽溶液中親水性較強(qiáng)的物質(zhì)分子內(nèi)部的疏水基團(tuán)外露,這些疏水基團(tuán)可以與疏水的固定相以疏水作用力相結(jié)合(吸附)。由于不同物質(zhì)與固定相之間的疏水作用力大小不同,可以通過改變極性流動(dòng)相的離子強(qiáng)度(由高到低)來使這些物質(zhì)依次解吸附,從而實(shí)現(xiàn)分離。具體來說,高濃度的鹽液先將吸附力弱(極性大)的物質(zhì)洗脫下來,而低濃度的鹽則使吸附力強(qiáng)(極性小)的物質(zhì)后洗脫下來。對(duì)于極性非常強(qiáng)的物質(zhì),可能需要在流動(dòng)相中添加有機(jī)溶劑以降低其極性,從而使其解吸附,但此時(shí)需注意防止有效成分變性。
 
  疏水色譜柱的結(jié)構(gòu)包括填料、填充率、碳數(shù)、孔徑大小、填充劑密度等關(guān)鍵要素。其中,填料的疏水性質(zhì)主要由碳鏈、芳香族、烷基等疏水基團(tuán)構(gòu)成。填充率越高,疏水作用越強(qiáng);碳數(shù)越多,水作用也越強(qiáng);孔徑大小則直接影響分離效果,孔徑越小,分離效果通常越好;而填充劑密度則關(guān)系到柱效的高低,密度越大,柱效越高。
 
  優(yōu)點(diǎn):
  分離效果好:能夠高效分離不同性質(zhì)的物質(zhì)。
  選擇性強(qiáng):通過調(diào)整流動(dòng)相條件可以精確控制分離過程。
  適用范圍廣:可用于多種類型樣品的分離。
  操作簡(jiǎn)便:自動(dòng)化程度高,易于操作。
  柱效穩(wěn)定:在正確使用和維護(hù)下,杜效能夠保持穩(wěn)定,
 
  局限性:
  對(duì)于水溶性樣品適用性較差。
  疏水基團(tuán)易受污染,可能影響分離效果。
  可能存在柱壽命較短的問題,特別是當(dāng)處理高濃度或腐蝕性樣品時(shí)。

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