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皖儀離子色譜法測定多肽中的哌啶

來源:安徽皖儀科技股份有限公司   2024年07月31日 10:01  

皖儀離子色譜法測定多肽中的哌啶


關(guān)鍵詞:離子色譜;多肽;合成;哌啶;方法學(xué)。

 

引言


哌啶是一種含有兩個(gè)碳和一個(gè)氮的環(huán)狀有機(jī)化合物。在多肽合成中,哌啶主要是作為一個(gè)結(jié)構(gòu)單元或一個(gè)反應(yīng)的底物存在。哌啶在多肽合成中起到了多種作用,從結(jié)構(gòu)單元到保護(hù)基團(tuán),再到反應(yīng)底物和優(yōu)化反應(yīng)條件。哌啶在最終合成的多肽中有所殘留,而哌啶具有毒性,是一種升壓劑,因此必須控制最終產(chǎn)物的哌啶殘留量。皖儀開發(fā)了一種離子色譜測試方法檢測多肽中哌啶的含量,樣品前處理操作簡單,測試準(zhǔn)確性高,重復(fù)性良好,與其他組分間分離度良好,可以滿足客戶大規(guī)模測試的要求,并且提高時(shí)效性,測試結(jié)果一致性,減少人為及系統(tǒng)誤差。

 

1、實(shí)驗(yàn)方法


1.1
測試條件儀器:

 

IC6600系列離子色譜儀配置電導(dǎo)檢測器

 

1.png

圖為IC6600系列多功能離子色譜儀

 

  

色譜柱:MS-5C-P1陽離子色譜柱(4.6mm×250mm);
保護(hù)柱:陽離子保護(hù)柱(30 mm×4 mm);

柱溫:30℃

流速:1.0ml/min

進(jìn)樣量:25μL

檢測器:電導(dǎo)檢測器。

 

1.2 使用試劑標(biāo)樣:哌啶標(biāo)準(zhǔn)樣品(客戶提供的純哌啶)

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備標(biāo)準(zhǔn)原液的制備:稱量0.100g純哌啶移至100mL容量瓶用純水定容至刻度線。

標(biāo)準(zhǔn)樣品工作液:分別吸取0.002mL0.005mL0.01mL0.02mL0.05mL0.08mL0.10mL母液(1000mg/L)10mL容量瓶中,用超純水定容至刻度,配得哌啶質(zhì)量濃度為0.2mg/L0.5mg/L1mg/L2mg/L5mg/L8mg/L10mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。臨用現(xiàn)配。

 

1標(biāo)準(zhǔn)系列曲線濃度梯度表

2.png

 

2、測試結(jié)果

 

2.1 哌啶線性測試結(jié)果

依次移取0.2mg/L0.5mg/L1mg/L2mg/L5mg/L8mg/L10mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)工作曲線工作液,按照1.1工作測試條件得到標(biāo)準(zhǔn)曲線多點(diǎn)重疊圖如圖1,哌啶在該色譜條件下線性相關(guān)系數(shù)R=0.999以上,線性良好。

 

 

3.png

1 哌啶標(biāo)準(zhǔn)曲線重疊色譜圖

 

2線性方程

4.png


 

2.2 樣品譜圖

1.1的工作測試條件下條件下,對樣品進(jìn)行檢測。樣品圖譜如圖2所示樣品圖譜中的目標(biāo)哌啶離子峰形對稱,分離度良好,最終得到樣品中哌啶的含量。樣品中哌啶含量為2.283mg/L,樣品重復(fù)性良好樣品RSD0.301%,符合客戶需求。

 

2 樣品測試譜圖

5.png


 

 

3、總結(jié)

 

本次采用皖儀科技離子色譜儀IC6600系列對樣品中的哌啶進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線驗(yàn)證、重復(fù)性驗(yàn)證。測試結(jié)果峰形較好,線性良好,重復(fù)性滿足要求,靈敏度高完全滿足測試要求。


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