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探究溫度對液相色譜分析的影響

來源:島津企業管理(中國)有限公司   2024年07月29日 09:53  

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本期就溫度對高效液相色譜分析的影響展開說明,重點介紹柱溫和環境溫度對分析的影響。

一、柱溫對高效液相色譜分析的影響,通過范特霍夫方程來表達。

 

原則上,范特霍夫方程是用于計算在不同溫度下某反應平衡常數的方程:

㏑K=-△H/RT+△S/R

   K:保留因子,描述色譜柱溫度相關系數

△H:流動相和固定相之間分析物的

△S:相應的熵變        

   R:相位關系的常數        T:溫度

 

從公式中可以看出:lnk與時間1/T之間是線性關系,實際上因物質特性、條件差異不一定出現良好相似性,在高效液相色譜檢測中柱溫的變化常常會造成某些指標不良。

 

案例柱溫對含量、分離度及理論塔板數的影響。

 

某公司測試果糖及葡萄糖含量,分離度及理論塔板數結果異常。

1含量結果誤差大

< 數據對比結果 >

img1 

 

2分離度及理論塔板數下降

< A數據 >

圖表, 折線圖

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<B數據 >

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3原因分析

樣要求溫度:85℃,糖類分析通常高溫會帶來高分離度,但超過90℃之后幾乎沒有變化,柱溫低于70℃對于許多糖類來說,不能提供足夠分離度。

 

經排查發現,柱溫箱溫度偏差較大,與實際溫度相差20度,修正柱溫后,測試正常。

 

二、環境溫度對高效液相色譜分析的影響,歸類來說主要包含兩個方面:其一對檢測器影響;其二對流動相影響。

 

案例二:室溫對基線噪音的影響;某公司測試過程中基線噪音異常變大。

 

img4 

設置波長接近流動相截止波長時,室溫波動超過1℃引發噪音變大。室溫穩定后,基線正常。

圖表

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案例三:某公司測試過程中保留時間異常。

 

圖示

描述已自動生成 

室溫波動超過3℃以上會引發壓力波動,室溫穩定后重新測試,保留時間正常。

圖表

描述已自動生成 

圖表

中度可信度描述已自動生成 

 

檢查室溫變化發現,室溫波動范圍2-4度左右,柱壓隨室溫變化而變化。

 

以上可知,環境溫度對高效液相色譜分析的影響,主要在以下兩個方面。

 設置波長接近流動相截止波長且室溫波動大于1℃的情況下,造成噪音過大的情況,不影響保留時間。

② 流動相不在截止波長范圍且室溫波動大于3℃以上的情況下,造成流動相溫度的變化,進而影響保留時間、基線漂移,但不影響基線噪音。

通過檢測器的原理,我們可以發現PDA、RF、RID等檢測器也易受環境溫度的影響。

四季更迭,氣溫波動。液相色譜儀使用中應關注溫度變化,從而消除溫度對分析的影響。

 

 

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