實驗室正置熒光顯微鏡的原理及操作步驟

來源：上海蔡康光學儀器有限公司 2024年07月19日 14:19

熒光顯微鏡是一種能夠通過熒光物質發出的光來增強樣本顯影的顯微鏡。它與普通光學顯微鏡相比，能夠提供更高的分辨率和對樣本更細微的觀察。

原理：

熒光顯微鏡的基本原理涉及以下幾個關鍵步驟：

激發：熒光顯微鏡使用紫外線（UV）或藍光等短波長的光來激發樣本中的熒光染料或熒光蛋白。這些染料或蛋白吸收高能量的光子，從而激發到一個高能級。

發射：激發后，這些物質會以較低能量的光子重新發射光，通常是可見光的波長。發射的光會經過顯微鏡的光學系統，最終被目標物鏡放大和觀察。

濾波：熒光顯微鏡使用特定的濾光片來選擇性地通過激發光或發射光，以確保觀察到清晰的熒光圖像。

操作步驟：

下面是正置熒光顯微鏡的基本操作步驟：

打開設備：

打開熒光顯微鏡主體電源，并確保設備的所有部分都正常工作。

調整照明系統：

使用熒光顯微鏡時，通常需要通過激發光源（如汞燈、氙燈或LED）來提供紫外線或特定波長的藍光激發光。根據樣本和熒光染料的要求，選擇適當的激發光源和濾光片。

調焦和放大：

將樣本放置在顯微鏡的樣本臺上，并使用可調節高度的物鏡調焦機構將樣本移至焦點。根據需要選擇合適的物鏡放大倍數。

觀察和調節：

在觀察過程中，通過調節光源強度、物鏡放大倍數和焦距來優化圖像質量。確保熒光顯微鏡的光學系統處于最佳狀態。

記錄和分析：

根據觀察到的熒光圖像記錄數據，并進行必要的分析和測量。熒光顯微鏡常用于觀察細胞標記、分子交互作用、組織結構等。

關閉設備：

在使用完畢后，關閉熒光顯微鏡的光源和電源，謹慎處理任何敏感的熒光染料和樣本。

熒光顯微鏡的操作需要一定的訓練和經驗，特別是在調節光學系統和優化圖像質量時。隨著技術的發展，現代熒光顯微鏡也配備了計算機控制和圖像處理軟件，使得圖像分析和數據記錄更加高效和精確。

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