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氨丁三醇緩沖液pH范圍及配制方法詳解

來源:艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司   2024年07月19日 12:57  

一、Tris緩沖液pH范圍

Tris緩沖液在生物化學(xué)研究中使用較廣泛的一種緩沖劑,它的常用有效pH范圍是在“中性”范圍,如:

Tris緩沖液:pH=7.5~9

Tris-HCl緩沖液:pH=7.5~8.5

Tris-磷酸鹽緩沖液:pH=5.0~9.0

 

二、Tris緩沖液的配制方法

1.某一特定pH值的0.05mol/L Tris緩沖液的配制:將50ml 0.1mol/L Tris堿溶液與下表所示相應(yīng)體積(單位:ml)的0.1ml/L HCl混合,加水將體積調(diào)至100ml。

圖片11.png 

 

2.Tris-HCl緩沖液的兩種配置方法

第一種方法是分別配制0.05 mol/L Tris和0.05 mol/L HCl溶液,然后按常用表中所列體積混合即可。

但是由于標(biāo)準(zhǔn)濃度的稀鹽酸不易配制,所以常用另一種方法:以配置1 L 0.1 mol/L的Tris-HCl緩沖液為例:先稱12.11 g Tris堿溶于950 mL~970 mL 去離子水中,邊攪拌邊滴加4 N HCl,用pH計(jì)測(cè)定溶液pH值至所需的pH值,然后再加水補(bǔ)足到1 L。

 

三、其他Tris衍生緩沖液

除了Tris-HCl之外,Tris還有多種衍生緩沖液:

TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的組織或Western Blotting中的蛋白印跡膜等;

TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液;

TE=Tris-HCl+EDTA,對(duì)DNA的堿基有保護(hù)性,常被用于DNA的穩(wěn)定和儲(chǔ)存;

TAE=Tris base+乙酸+EDTA,是大片段DNA短時(shí)間電泳時(shí)廣泛使用的緩沖系統(tǒng);

TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,適用于長時(shí)間DNA電泳,對(duì)較小片段分離效果較好。

 

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