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人膽囊上皮細胞永生化+GFP傳代/復蘇技巧

來源:上海研謹生物科技有限公司   2024年07月15日 16:50  

人膽囊上皮細胞永生化+GFP

Immortalization of human gallbladder epithelial cells

貨號:YJ-004a(免疫熒光鑒定)

價格: 3200.0

規格: 5*10 5

細胞詳述

膽囊,是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構造,有濃縮和儲存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。

膽囊內面以粘膜覆蓋,有發達的皺襞。膽囊收縮排空時,皺襞高大而分支;膽囊充盈時,皺襞減少變矮。粘膜上皮為單層柱狀,內分散分部著少量杯狀細胞。膽囊粘膜細胞具有典型的吸收型細胞的特征,具有較強的吸收和濃縮功能,上皮細胞吸收膽汁中的水和無機鹽,經細胞側面的質膜轉運至上皮細胞間隙內,吸收的水和無機鹽通過基膜進入固有層的血管和淋巴管內。同時,膽囊粘膜亦有分泌功能,分泌粘液。

該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。

細胞特性

1) 細胞來源于人膽囊組織。

2) 細胞鑒定:細胞角蛋白19(CK-19)免疫熒光染色為陽性。

3) 經鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5) 細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養。

細胞篩選

該細胞為穩定轉染GFP的細胞,隨細胞傳代次數的增加,其GFP熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。

建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。

初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養基維持培養,若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養基繼續篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養基培養,至細胞密度約80%,可繼續加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥完全培養基正常培養。

產品的運輸和保存

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1) 1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2) T-25培養瓶充滿完全培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

產品使用

1) 本產品僅能用于科研

2) 本產品未通過直接用于活體動物和人的審核

3) 本產品未通過用于活體診斷的審核

人膽囊上皮細胞永生化+GFP.png


 

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