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電泳緩沖液有何作用?

來源:上海聯碩生物科技有限公司   2024年07月15日 09:04  

電泳緩沖液是核酸、蛋白質凝膠電泳系統的一個重要組成, 是電泳場中的導體,也是維持電泳系統恒定 pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。

電泳緩沖液的作用:
1.緩沖液在電泳過程中的一個作用是維持合適的pH。電泳時陽極與陰極都會發生電解反應,陽極發生的是氧化反應(4OH--4e->2H2O+O2),陰極發生的是還原反應(4H++4e->2H2),長時間的電泳將使陽極變酸,陰極變堿。一個好的緩沖系統應有較強的緩沖能力,使溶液兩極的pH保持基本不變。

2.電泳緩沖液的另一個作用是使溶液具有一定的導電性,以利于DNA分子的遷移,例如,一般電泳緩沖液中應含有0.01-0.04mol/L的Na+離子,Na+離子的濃度太低時電泳速度變慢;太高時就會造成過大的電流使膠發熱甚至熔化。

3.電泳緩沖液還有一個組分是EDTA,加入濃度為1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等離子,防止電泳時激活 DNA酶,此外還可防止Mg2+離子與核酸生成沉淀。

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