NLRP3(NOD、LRR和pyrin結構域蛋白3)在巨噬細胞中表達,是研究最為廣泛的炎癥小體蛋白。由于其在阿爾茨海默病、帕金森病、2型糖尿病和多發(fā)性硬化癥等多種炎癥性疾病中的異常激活,NLRP3受到了廣泛關注。作為一種模式識別受體,NLRP3能夠感知感染性微生物和壓力信號后形成炎癥小體,誘導細胞因子IL-1β和IL-18的成熟和分泌,并引起細胞焦亡,啟動炎癥反應。NLRP3炎癥小體是先天免疫系統(tǒng)啟動炎癥反應的重要組成部分,其最佳激活有利于宿主高效快速地消滅入侵的病原體。然而,異常的NLRP3炎性小體激活與多種炎癥相關疾病有關。因此,NLRP3是治療多種炎癥相關疾病的有前途的治療靶點。
HP-1細胞經(jīng)過NLRP3 CRISPR/Cas9慢病毒轉(zhuǎn)導,誘導了Cas9和靶向NLRP3的sgRNA的表達。48小時后,細胞用PE標記的抗人NLRP3多克隆抗體染色,并通過流式細胞術進行分析。未轉(zhuǎn)導的THP-1細胞顯示為藍色,NLRP3被敲低的轉(zhuǎn)導細胞顯示為綠色。
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