隨著NK細胞治療熱度的持續攀升，其合規生產也越來越受重視，本文重點講述了幾個不同來源NK細胞的工藝開發案例和未來展望：

一、PB-NK/外周血NK：

*滋養細胞共培養

收集健康供體單采血，并從中分離外周血單個核細胞，再用VarioMACS設備去除T細胞后，將其轉移到A-350N透氣袋中與輻照后的自體PBMC共培養，添加OKT3和IL-2，經14天培養，可以獲得高純度的NK細胞(>98%，CD3?CD16+CD56+），且擴增倍數可達520-860。

*無滋養細胞

此外，也有研究開發了無滋養細胞，符合GMP的NK細胞規?；a工藝。取代滋養細胞的是可以表達IL-21和41BB配體的膜顆粒。

首先用CliniMACS Prodigy系統去除CD3+T細胞，并通過膜顆粒刺激NK細胞并在Prodigy中初步擴增；然后轉移到Xuri波浪生物反應器中通過灌流培養進行規模擴增。

最后，NK細胞通過LOVO設備進行清洗收獲，并使用CBS 2101降溫儀進行低溫保存。該工藝在不到2周的時間內可以使PB-NK細胞擴增1000倍，而且NK細胞在該平臺培養40多天之后，可以實現高達10^8倍的擴增效果，同時保持細胞毒性潛能。