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電泳緩沖液的特點是什么?

來源:上海聯(lián)碩生物科技有限公司   2024年07月08日 14:34  

電泳緩沖液是核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個重要組成, 是電泳場中的導(dǎo)體,也是維持電泳系統(tǒng)恒定 pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。

電泳緩沖液的特點:
1.TAE是使用的緩沖系統(tǒng)。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質(zhì)量(TBE中電泳時測出的相對分子質(zhì)量會大于實際分子質(zhì)量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的缺點是緩沖容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用,除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。

2.TBE的特點是緩沖能力強,長時間電泳時可選用TBE,并且當(dāng)用于電泳小于1kb的片段時分離效果更好。TBE用于瓊脂糖凝膠時易造成高電滲作用,并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價結(jié)合的四羥基硼/酸鹽復(fù)合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收電泳中使用。

3.TPE的緩沖能力也較強,但由于磷酸鹽易在乙醇沉淀過程中析出,所以也不宜在回收DNA片段的電泳中使用。

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