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大小鼠水迷宮實驗操作方法

來源:世聯博研(北京)科技有限公司   2024年06月26日 11:36  

Morris水迷宮(Morriswatermaze,MWM)實驗是一種強迫實驗動物(大鼠、小鼠)游泳,學習尋找隱藏在水中平臺的一種實驗,Morris水迷宮主要用于測試實驗動物對空間位置感和方向感(空間定位)的學習記憶能力,被廣泛應用于學習記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老、新藥開發/篩選/評價、藥理學、毒理學、預防醫學、神經生物學、動物心理學及行為生物學等多個學科的科學研究和計算機輔助教學等領域,在世界上已經得到廣泛地認可,是醫學院校開展行為學研究尤其是學習與記憶研究的手選經典實驗。




     在介紹實驗步驟之前,我們需要先了解下水迷宮實驗的兩大要素,驅動力和考核內容。水迷宮的驅動力是小鼠本能對水環境的厭惡,這就會驅使小鼠想盡快離開這個環境,其中略低于水面的平臺就可以讓小鼠基本達成逃離水環境的目標,因此小鼠有動力盡快找到這個平臺;而考核內容則是分析小鼠是不是能夠盡快學會用周圍的提示物(Cues)為線索找到水下平臺,絕大多數的水迷宮實驗主要(但不限于)以下三個部分:


     1、平臺可見期實驗(2days) 2、平臺隱藏期訓練(5day) 3、無平臺期檢測(1day)


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圖一:標準水迷宮實驗日期表(不含適應環境期)




     實驗需要用到的儀器: 系統由水迷宮水池、攝像系統以及Xeye動物行為軌跡分析系統組成。



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實驗方法;


     1. 獲得性訓練


   (1)將動物(大鼠或小鼠)頭朝池壁放入水中,放入位置隨機取東、西、南、北四個起始位置之一。記錄動物找到水下平臺的時間(s)。在前幾次訓練中,如果這個時間超過60s,則引導動物到平臺。讓動物在平臺上停留10s.


   (2)將動物移開、擦干。必要時將動物(尤其是大鼠)放在150W的白熾燈下烤5min,放回籠內。每只動物每天訓練4次,兩次訓練之間間隔15~20min,連續訓練5d。


     2. 探查訓練


     最后一次獲得性訓練結束后的第二天,將平臺撤除,開始60s的探查訓練。將動物由原先平臺象限的對側放入水中。記錄動物在目標象限(原先放置平臺的象限)所花的時間和進入該象限的次數,以此作為空間記憶的檢測指標。


    3. 對位訓練


     測定動物的工作記憶(workingmemory)。探查訓練結束后的第二天,開始維持4天的對位訓練。將平臺放在原先平臺所在象限的對側象限,方法與獲得性訓練相同。每天訓練4次。每次記錄找到平臺的時間和游泳距離以及游泳速度。


    4. 對位探查訓練


    最后一次對位訓練的第二天進行。方法與上述探查訓練類似。記錄動物60s內動物在目標象限(平臺第二次所在區)所花時間和進入該區的次數。


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