“噸噸噸噸......”喝一杯之前要注意它的含量！

前言

酒的背后，可謂一門博大精深的學(xué)問，其中蘊(yùn)含著豐富的文化和歷史，也有許多令人驚嘆的知識(shí)點(diǎn)，不同的酒也有著不同的意義和作用。白酒是中國(guó)特有的酒類，以高粱等糧食為原料，經(jīng)過多道工序釀制而成，不僅口味獨(dú)特，還帶有濃烈的香氣，在中國(guó)常常作為社交和聚會(huì)的重要元素。葡萄酒則是以葡萄為原料，經(jīng)過發(fā)酵和陳釀而得，常常帶有果香和橡木香，在西方，葡萄酒則被視為高雅的享受。而黃酒則是烹飪中不可缺少的調(diào)味品之一 ，它具有濃郁的香氣，甘甜味美，風(fēng)味醇厚，并含有氨基酸、糖、醋、有機(jī)酸和多種維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

但是，這些酒在發(fā)酵生產(chǎn)的過程中，通過植物或微生物體內(nèi)代謝可能生成一些添加劑，也可能是食品原料自身存在，或者是在酒加工的過程中會(huì)使用到一些添加劑。為了人體健康，我們需要根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)酒中的添加劑進(jìn)行含量檢測(cè)。本篇介紹的是皖儀科技高效液相色譜對(duì)酒中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的檢測(cè)。

2、儀器配置及實(shí)驗(yàn)方法

2.1 儀器配置

LC3200系列高效液相色譜儀

表1 皖儀液相配置清單表

2.2 實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1 試劑配制

表2 試劑清單

2.2.1.1 乙酸銨溶液

取1.54g乙酸銨，加入適量水溶解，用水定容至1000mL，經(jīng)0.22μm水相微孔濾膜過濾后備用。

2.2.1.2 苯甲酸、山梨酸和糖精鈉混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作曲線取苯甲酸、山梨酸和糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（購(gòu)買的標(biāo)準(zhǔn)品，濃度為1000mg/L）適量，配制成質(zhì)量濃度分別為0mg/L，1.00 mg/L，5.00 mg/L，10.0 mg/L，20.0 mg/L，50.0 mg/L，100 mg/L和200 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液。

2.2.2 色譜條件

表3 色譜條件

2.2.3 實(shí)驗(yàn)前處理

準(zhǔn)確稱取約2g(精確到0.001g)試樣與50mL具塞離心管中，加水約25mL，渦旋混勻，與50℃水浴超聲20min，冷卻至室溫后于8000r/min離心5min，將水相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，在殘?jiān)屑铀?0mL，渦旋超聲5min，于8000r/min離心5min，將水相轉(zhuǎn)移至同一50mL容量瓶中，并用水定容至刻度，混勻。取適量上清液過0.22μm濾膜，待液相色譜測(cè)定。

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 系統(tǒng)適用性

圖1 200mg/L混標(biāo)測(cè)試譜圖

表4 200mg/L混標(biāo)測(cè)試數(shù)據(jù)

說明：由譜圖和表格數(shù)據(jù)可知，苯甲酸、山梨酸和糖精鈉峰型均良好，目標(biāo)峰周圍無(wú)雜峰，理論塔板數(shù)高，分離度均大于1.5，滿足實(shí)驗(yàn)要求。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)試結(jié)果

圖3 山梨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)試結(jié)果

圖4 糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)試結(jié)果

說明：由以上譜圖可知，苯甲酸、山梨酸和糖精鈉曲線相關(guān)系數(shù)R值分別為0.9999、1.000、0.9999，均在0.9999以上，滿足實(shí)驗(yàn)要求。

3.3 重復(fù)性

  圖5 20mg/L混標(biāo)6針重復(fù)性測(cè)試譜圖

表5 20mg/L混標(biāo)6針保留時(shí)間重復(fù)性測(cè)試數(shù)據(jù)

表6 20mg/L混標(biāo)6針峰面積重復(fù)性測(cè)試數(shù)據(jù)

說明：根據(jù)以上表格數(shù)據(jù)可知，苯甲酸、山梨酸和糖精鈉保留時(shí)間重復(fù)性RSD分別為0.086%、0.083%、0.1%。重復(fù)性好。峰面積重復(fù)性RSD分別為0.438%、0.426%、0.408%，重復(fù)性較好。均滿足實(shí)驗(yàn)要求。

3.4 檢出限

圖6 1mg/L混標(biāo)測(cè)試譜圖

表7 1mg/L混標(biāo)測(cè)試數(shù)據(jù)

說明：根據(jù)上表數(shù)據(jù)，3倍信噪比為檢出限計(jì)算可知，苯甲酸、山梨酸和糖精鈉檢出限分別為0.012mg/L，0.011mg/L，0.026mg/L。滿足實(shí)驗(yàn)要求。

3.5 某品牌白酒、某品牌葡萄酒和某品牌黃酒測(cè)試結(jié)果

圖7 某品牌白酒測(cè)試譜圖

圖8 某品牌葡萄酒測(cè)試譜圖

圖9 某品牌黃酒測(cè)試譜圖

表8 某品牌白酒、葡萄酒和黃酒測(cè)試結(jié)果

說明：根據(jù)上表數(shù)據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.28-2016的分析結(jié)果的表述中公式計(jì)算可知。某品牌白酒苯甲酸計(jì)算結(jié)果為0.00048g/kg，糖精鈉為0.00935g/kg。滿足GB 2760-2024中苯甲酸的最大使用量0.4g/kg，糖精鈉最大使用量0.15g/kg。某品牌葡萄酒苯甲酸計(jì)算結(jié)果為0.00449g/kg，山梨酸為0.00198g/kg，滿足GB 2760-2024中苯甲酸的最大使用量0.8g/kg，山梨酸最大使用量0.2g/kg。某品牌黃酒苯甲酸計(jì)算結(jié)果為0.00185g/kg，滿足GB/T 13662-2018中苯甲酸最大值0.05g/kg。

3.6 注意事項(xiàng)

在使用離心機(jī)前需要注意要將離心管等重。

4、總結(jié)

本篇采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置紫外檢測(cè)器。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，系統(tǒng)適應(yīng)性測(cè)試苯甲酸、山梨酸和糖精鈉峰型均良好，目標(biāo)峰周圍無(wú)雜峰，理論塔板數(shù)高，分離度均大于1.5，滿足實(shí)驗(yàn)要求。苯甲酸、山梨酸和糖精鈉曲線相關(guān)系數(shù)R值分別為0.9999、1.000、0.9999，均在0.9999以上。苯甲酸、山梨酸和糖精鈉保留時(shí)間重復(fù)性RSD分別為0.086%、0.083%、0.1%。峰面積重復(fù)性RSD分別為0.438%、0.426%、0.408%，重復(fù)性好。苯甲酸、山梨酸和糖精鈉檢出限分別為0.012mg/L，0.011mg/L，0.026mg/L。以上各項(xiàng)數(shù)據(jù)結(jié)果均滿足國(guó)標(biāo)方法中對(duì)儀器的要求。