一、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
未拆封的血清,一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃,在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi),再放回冷凍。
將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。
但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
溶解后建議盡快使用,若長時間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。
二、血清中絮狀沉淀怎么處理?
1.將冷凍保存的血清取出后,置4℃冰箱靜止過夜;
2.待血清融化后,上下顛倒,輕輕混勻,繼續(xù)4℃2-3小時;
3.輕輕吸取上層血清,分裝,余底下50ml左右;
4.低速離心5分鐘,去掉沉淀。
三、解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)該怎么處理?
胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。
但這些絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。
若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將胎牛血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。
不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
解凍胎牛血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
解凍胎牛血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請勿將胎牛血清置于37℃太久。
若在37℃放置太久,胎牛血清會變得混濁,同時胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響胎牛血清的質(zhì)量。
胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。
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