傳統的轉染技術無法有效轉染許多常用于細胞療法的細胞類型，如原代T細胞。而電穿孔是一種強大的轉染工具，它利用電脈沖瞬時增加細胞膜的通透性，使裸物質（如DNA/RNA、蛋白質等）短時大量進入細胞完成載體遞送，以更低成本、更靈活高效和更安全可持續的優勢，成為非病毒載體轉染中前景的新興技術之一。

然而你真的了解電穿孔技術嗎

RegMedNet所推出的電穿孔工具書中邀請到了Arsenal Biosciences的聯合創始人Theodore Roth和Lonza細胞工程研發主管Ludger Altrogge，重點回答了六道精華問題。

Theodore Roth

Arsenal Biosciences

聯合創始人

Ludger Altrogge

Lonza細胞工程研發主管

Interview

超越障礙：

關于非病毒轉染的訪談

Q1

Ludger, 電穿孔等非病毒方法在基因修飾方面的優勢在哪里？

非病毒方法在使用的貨物/底物類型方面具有靈活性。例如，它不能只傳遞核酸(DNA、mRNA)，也不能傳遞蛋白質，如用于CRISPR基因編輯的Cas9 RNPs。非病毒方法既適用于治療基因的瞬時表達，也適用于細胞的穩定遺傳工程。前者可以通過通過傳遞mRNA或DNA（質粒、而轉座酶系統（如睡美人或 PiggyBac）以及用于定向整合的工程化核酸酶（如CRISPR）可實現穩定的細胞基因工程。基于病毒和轉座酶的改造通常更有效，但由于整合在基因組中隨機發生，因此可控性較差。將工程化的核酸酶作為重組的RNPs運送，可以更好地控制修飾的劑量。

Q2

Theo，你是如何在實驗室中使用電穿孔技術的？

Q3

Ludger，你能詳細介紹一下龍沙提供的非病毒基因轉移技術嗎？

Q4

Theo，在你看來，使用Nucleofector™技術進行CRISPR/Cas9介導的基因組編輯有哪些優勢？

Q5

Theo，你們也進行 CRISPR 篩選嗎？

Q6

Theo，您認為核轉染技術在治療方法和藥物開發中的應用前景如何？

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