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胎牛血清是一種常用的細胞培養(yǎng)添加劑，它提供細胞生長必需的營養(yǎng)物質、生長因子和附著因子。為了確保FBS的長期保存和使用效果，正確的凍存和復蘇操作至關重要。以下是關于胎牛血清凍存和復蘇的詳細描述：
1. 胎牛血清的接收與檢查：
- 在接收新的FBS時，應檢查外包裝是否完好無損，以確保無菌條件。
- 確認血清的生產日期、有效期和批次號，以便追溯和質量控制。
2. 凍存前的準備工作：
- 在凍存前，F(xiàn)BS應存放在2-8°C的冰箱中，避免反復凍融，因為這會影響血清中的蛋白質和其他成分的穩(wěn)定性。
- 準備適量的無菌凍存管或瓶子，并確保它們的密封性能良好。
3. 分裝與標記：
- 根據使用需求，將FBS分裝到準備好的凍存管中，避免一次性解凍大量血清，以減少反復凍融對血清質量的影響。
- 在每個凍存管上清晰標記血清的批次號、分裝日期和有效期，以便使用時能夠追溯。
4. 凍存方法：
- 將分裝好的FBS放入-20°C冰箱中預凍數小時，然后轉移到-80°C超低溫冰箱或液氮罐中長期保存。
- 確保凍存過程中溫度的逐漸降低，避免快速冷凍導致的血清成分變性。
5. 復蘇(解凍)步驟：
- 在使用FBS前，將其從凍存環(huán)境中取出，并在2-8°C的冰箱中緩慢解凍，通常需要過夜。
- 避免在室溫下長時間放置，以防細菌污染和血清成分的變化。
- 也可以將凍存管置于37°C水浴中快速解凍，但需注意防止水浴的污染。
6 使用與再凍存
- 解凍后的FBS應在解凍當天使用，以保證其生物活性和營養(yǎng)成分的完整性。
- 如果一次未使用完，可以將剩余的FBS重新凍存，但應注意避免反復凍融，因為這會降低血清的質量。
7. 注意事項：
- 在整個凍存和復蘇過程中，應嚴格遵守無菌操作規(guī)程，以防止微生物污染。
- 使用無菌的移液工具和容器，避免交叉污染。
- 定期檢查凍存設備的溫度記錄，確保凍存環(huán)境穩(wěn)定。
8質量控制：
- 在使用新批次的FBS之前，建議進行小規(guī)模的細胞培養(yǎng)試驗，以評估血清的質量和適用性。
- 記錄每次凍存和復蘇的詳細信息，包括日期、時間和使用情況，以便在出現(xiàn)問題時進行追溯。
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