1. 檢查設備：確保高壓蒸汽滅菌鍋的外觀完好，并且所有控制開關和指示燈正常工作。

2. 加水：打開高壓蒸汽滅菌鍋頂部的進水閥，將清潔凈化水或蒸餾水倒入蒸汽鍋內，使水位達到設定標志線。注意水位不低于加熱圈，且在擋板以下。

3. 放置物品：將需要滅菌處理的物品（如培養基、蒸餾水或其他器皿）清潔后放入高壓蒸汽滅菌鍋內，注意物品之間要留有空隙，且不要超過設定的容量。

4. 密封鍋蓋：將高壓蒸汽滅菌鍋的門或蓋嚴密地關閉，并確保鎖緊裝置牢固。

5. 設定參數：根據實際情況和要求，在控制面板上設定好滅菌溫度（如普遍規則為含葡萄糖培養基115℃，不含葡萄糖的培養基121℃）、時間（如普遍規則為含葡萄糖培養基30分鐘，不含葡萄糖的培養基20分鐘）等參數。

6. 啟動設備：插上電源，將高壓蒸汽滅菌鍋啟動，開始進行滅菌處理。

7. 滅菌完成后，需等待滅菌鍋內的溫度降至安全范圍（如60℃以下）且壓力降為0時，才能打開鍋蓋取出物品。

8. 后處理：根據需求對滅菌后的物品進行后處理，如迅速封裝或使用，避免二次污染。

此外，在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，還需要注意以下事項：

1. 只有專業人員才能操作高壓蒸汽滅菌鍋，應經過相關培訓并熟悉設備的使用說明書。

2. 保持設備周圍的通道暢通，設備上方的排氣系統應連接到安全通風處。

3. 在滅菌過程中，應不斷監測設備內的溫度和壓力變化，以確保滅菌效果。

4. 在取出物品之前，應仔細檢查物品的整體狀況和滅菌效果，如有異常應及時處理。