聚集體是聚集的、錯誤折疊的蛋白質形成的包涵體，當泛素-蛋白酶體蛋白質降解機制不堪重負時，它們就會形成。通常，聚集體是在細胞應激反應下形成的，并提供了一種通過隔離錯誤折疊的蛋白質來保護細胞的機制，最終通過自噬作用清除這些蛋白質。蛋白質聚集體的形成還是多種人類疾病的特征，如阿爾茨海默病、帕金森病、肌萎s側索硬化癥或酒精性肝病。

本試劑盒中包含的PROTEOSTAT聚集體檢測試劑是一種分子轉子染料。在溶液中，沿著單個中心鍵的自由內旋轉阻止了熒光。PROTEOSTAT染料特別能夠插入到通常在錯誤折疊和聚集的蛋白質中發現的四聚體蛋白結構的交叉β脊柱中，這將抑制染料的旋轉并導致強烈的熒光。

PROTEOSTAT聚集體檢測試劑盒提供了一種快速、特異性和定量的方法來標記細胞中的聚集體，消除了對人工蛋白質突變的需求。PROTEOSTAT染料已在廣泛的條件下以及與小分子調節劑一起進行了驗證，證明了其適用于化合物篩選。此外，它還適用于多重共免疫熒光，以研究自噬和聚集體形成背景下的感興趣目標。

艾美捷PROTEOSTAT聚集體檢測試劑盒（ENZ-51035-0025）：

應用：流式細胞術、熒光顯微鏡、熒光檢測。

應用說明：PROTEOSTAT 聚集體檢測試劑盒的檢測方法可能適用于識別抑制聚集體形成的小分子，以及在聚集蛋白質貨物和涉及聚集體形成的各種蛋白質（如組蛋白去乙酰化酶6、帕金蛋白、共濟失調蛋白3、動力蛋白復合體和泛素蛋白-1）之間的免疫定位研究。

質量控制：每個批次的PROTEOSTAT 聚集體檢測試劑盒的樣本被用來對Jurkat細胞進行染色，并通過流式細胞術進行分析，使用用戶手冊中描述的程序。樣本的聚集體活性因子（AAF）值大于25。

數量：對于 ENZ-51035-0025：25次流式細胞術檢測或50次顯微鏡檢測。

對于 ENZ-51035-K100：100次流式細胞術檢測或200次顯微鏡檢測。

使用/穩定性：在適當的儲存條件下，試劑盒組分從收貨日期起穩定一年。

處理：避光保護。避免反復凍融。

運輸：使用藍冰。

短期儲存：-20°C。

長期儲存：-80°C。

內容物：

PROTEOSTAT®聚集體檢測試劑、

Hoechst 33342 核染色劑、

蛋白酶體抑制劑（MG-132）、

10X 檢測緩沖液。

PROTEOSTAT聚集體檢測試劑盒特色：

提供了一種敏感的基于細胞的藥物反應性檢測，用于在真實的細胞環境中識別與神經退行性疾病相關的抑制劑。

可靠且簡單的檢測不需要非生理性的蛋白質突變或遺傳工程化的細胞系。

在廣泛的條件和小分子調節劑下進行了驗證，證明了其適用于篩選具有潛在治療價值的化合物。

固定細胞檢測優化了抗體共定位研究。

通過流式細胞術容易量化聚集體和相關包含體。

適用于神經退行性疾病、肝病、毒理學研究等眾多領域的研究。

α-syn混合物在細胞質膜上形成聚集體，這些聚集體被內化為M17神經母細胞瘤細胞系。用α-syn單體（M）、超聲處理的α-syn PFFs（F）或α-syn混合物（M+F）處理M17細胞。4天后，M17細胞在固定前洗滌3次，然后用PROTEOSTAT®聚集染料（綠色）染色，并對α-syn（紅色）和β-catenin（灰色）進行免疫染色。比例尺=20µm。經“纖維蛋白生長和播種能力在α-突觸核蛋白介導的凋亡細胞死亡中起關鍵作用”作者許可使用的圖像。A-L Mahul Mellier等人；細胞死亡與分化（2015）。（doi:10.1038/cdd.205.79）。

PROTEOSTAT聚集體檢測試劑盒文獻參考：

Cyclophilin A supports translation of intrinsically disordered proteins and affects haematopoietic stem cell ageing: L. Maneix, et al.; Nat. Cell Biol. 265, 593 (2024)

Immunofluorescence and Aggresome Staining of Nothobranchius furzeri Cryosections: S. Bagnoli, et al.; Cold Spring Harb. Protoc. (2023)

Immunofluorescence and Aggresome Staining of Nothobranchius furzeri Cryosections: S. Bagnoli, et al.; Cold Spring Harb. Protoc. 2023, 693 (2023)