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螢光素酶如何成為理想的報告基因?

來源:上海瑋馳儀器有限公司   2024年04月16日 18:04  

一,什么是報告基因

報告基因:是一種編碼易被檢測的蛋白質或酶的基因,其表達產物非常容易被鑒定。

傳統基因表達檢測方法的問題:

1.通常檢測基因表達是通過RT-qPCR或qPCR(mRNA水平)或Western Blot(蛋白水平)

2.操作方法繁瑣,難于檢測

報告基因的優點:

1.蛋白表達水平檢測

2.檢測簡單,易于定量




二,什么是理想的報告基因

1.具有酶活性(信號放大能力

2.蛋白小

3.沒有內源性表達,背景低

4.易于定量

5.高靈敏度、線性范圍寬

6.反應迅速

三,螢光素酶

在生物醫藥行業最主要的報告基因為熒光素酶報告基因。最常見的熒光素酶 (luciferase)基因來源于螢火蟲。螢火蟲螢光素酶在ATP、氧氣和Mg2+存在條件下,催化螢光素的氧化羧化,釋放出光信號,這是任何已知生物發光系統中效率較高的發光反應,因而被設計用來檢測和定量哺乳動物細胞中螢火蟲螢光素酶的表達。相對于其他報告基因,螢光素酶具有諸多優勢:檢測靈敏度高,型號穩定性好,操作方便。

CHASELECTION逐典螢光素酶報告基因檢測試劑盒旨在準確、靈敏、高效地測定螢火蟲螢光素酶活性,應用高通量藥物篩選、藥物活性檢測、大規模啟動子功能測定、信號通路等研究。

逐典螢光素酶報告基因




針對報告基因檢測不同的側重需求,逐典推出了3種檢測系統。




逐典螢光素酶報告基因優勢:

1. 檢測靈敏度高,信號穩定性好

HEK293-NFK B-LUC細胞加入梯度稀釋的TNF 在37C、5%CO條件下刺激6小時后,分別用增強型、超敏型、穩定型檢測試劑進行信號檢測。




2. 操作方便

僅需將底物和螢光素酶檢測緩沖液混合后直接加入到細胞即可。




3. 穩定性好

同時在10次反復凍融實驗中,逐典全系列報告基因檢測試劑盒顯示出較強的穩定性。





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