在不斷發展的生物制藥和生命科學研究領域，尋找具有特性的新抗體至關重要。篩選不同動物物種的原代B細胞的能力將擴大回收抗體序列的多樣性，并能夠提升為治療、檢測試劑和基礎研究的不同應用找到最佳抗體的幾率。然而挖掘這些物種的抗體潛能一直具有挑戰性。在最新發布的應用說明中，我們概述了布魯克Beacon®單細胞光導系統和Opto® B Discovery產品組合如何提供一種快速篩選不同物種原代B細胞的新方法。

Opto® Memory B Discovery Workflow

Beacon®單細胞光導系統上的Opto® B Discovery 產品組合能夠在一周內對來自小鼠、人類和兔子原代樣品的B細胞進行功能篩選，從而快速選擇先導分子。將布魯克現有的 Beacon®單細胞光導系統與現已上市的Opto® Memory B Discovery試劑盒結合使用，可降低任何新物種的BCR全部成分的進入門檻，因為多種培養基配方已經過優化，可支持不同動物的B細胞激活和存活，并且許多現成試劑可用于B細胞富集和篩選（圖1）。

圖1. Opto Memory B Discovery工作流程可在一周內快速分離和激活記憶B細胞、功能優先的單B細胞篩選以及單克隆抗體序列的回收。

在不斷發展的生物制劑領域，找到具有特性的新抗體至關重要。在不同動物物種中篩選原代B細胞的能力擴大了回收的抗體序列的多樣性，并增加了在治療抗體、試劑抗體和基礎健康研究的多種應用領域找到最佳抗體的可能性。然而，挖掘這些物種的抗體潛力一直具有挑戰性。

Opto® Memory B Discovery樣品制備試劑盒能夠激活來自各種組織的記憶B細胞，包括新鮮外周血、整個器官（例如脾和淋巴結）和冷凍保存的PBMC，可實現人類和兔子記憶B細胞的穩健、無飼養層激活（圖2），然后進行芯片上測定篩選和下游序列回收。提供了一種快速篩選不同物種的原代B細胞的新方法。

圖2. 從血液或脾臟樣本中分離記憶B細胞，用Opto® Memory B Discovery樣品制備試劑盒（人或兔）激活，以產生適合篩選的抗體分泌細胞

我們最新的應用說明深入探討了這些試劑盒的適用性，證明了它們與來自小鼠、大鼠、羊駝、雞、牛、山羊和綿羊組織的記憶B細胞的兼容性。通過系統實驗，我們成功激活并篩選了來自相容物種的B細胞，從而通過下一代測序回收目標抗體序列。我們還探索了記憶B細胞分離和激活的過程，展示了我們專有的無飼養層培養基的效率和培養四小時后仍然能分泌IgG抗體的比例（圖3）。

圖3. 活化B細胞在芯片上加載4小時后繼續分泌IgG抗體的比例。

總體而言，我們證明人類和兔的Opto® Memory B Discovery試劑配方與小鼠、大鼠、羊駝、山羊和綿羊B細胞兼容，但是針對牛或雞B細胞的激活仍然需要優化。利用Beacon®系統的高通量能力，我們分離并篩選了數千到上萬個單個B細胞，加速抗體發現過程。雖然有些物種的抗體發現流程仍然需要提升，我們的發現為進一步優化奠定了基礎。

在這篇應用說明中除了為小鼠、人和兔單B細胞篩選提供優化的端到端工作流程外，研究人員還可以輕松調整第三方試劑，以快速實現與其他技術仍無法實現的其他高價值物種庫的兼容性。擴大對廣泛物種序列多樣性的探索，使研究人員能夠撒下更大的網，以增加發現用于開發新型療法、診斷和試劑的抗體的機會。