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皖儀科技液相色譜對醬黃瓜中脫氫乙酸的檢測

來源:安徽皖儀科技股份有限公司   2024年03月29日 08:51  

皖儀科技液相色譜對醬黃瓜中脫氫乙酸的檢測


前言

脫氫乙酸憑借自身良好的抗菌性,常以防腐劑應用于奶油、面包、月餅、糕點等食品制作領域。一般來說,脫氫乙酸少量食用并不會對身體產生太大的危害。如果長期食用或食用過量時,可能引發中樞神經系統中毒。通常表現為體重或其他生長指標降低,食欲不振等癥狀,嚴重者會出現凝血功能異常、抑制骨骼發育等情況。在食品安全問題備受關注的今天,對食品中脫氫乙酸的準確檢測更顯得尤為重要。

本篇文章參考了《食品安全國家標準 食品中脫氫乙酸的測定檢測方法》GB 5009.121-2016 高效液相色譜法色譜條件,采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置紫外檢測器進行檢測。實驗結果顯示,脫氫乙酸的線性良好,R值在0.999以上,脫氫乙酸標準品色譜峰正常,理論塔板數在9000以上。脫氫乙酸標準品重復進樣6次,保留時間RSD值為0.103%,峰面積RSD值為0.371%,重復性較好。以醬黃瓜作為測試樣品,可得醬黃瓜樣品中脫氫乙酸濃度為0.507μg/mL,檢出限為0.0294μg/mL,定量限為0.0980μg/mL。醬黃瓜樣品脫氫乙酸使用量為0.0025g/kg,檢測結果正常,說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器滿足醬黃瓜中脫氫乙酸的檢測需求。

關鍵詞:脫氫乙酸;高效液相色譜法;紫外檢測器;醬菜。

1 實驗方法


1.1  儀器配置

1.png

皖儀科技LC3200高效液相色譜儀

2.png

1. 高效液相色譜系統配置清單

1.2 實驗材料及輔助設備

甲醇:色譜純;

乙酸銨:優級純;

氫氧化鈉;

硫酸鋅;

脫氫乙酸標準品:CAS 520-45-6,純度大于99.5%

分析天平;

微孔濾膜:0.45μm

pH計;

超聲波清洗機;

渦旋混合器;

離心機:轉速≥4000 r/min

1.3測試條件

流動相:甲醇:0.02mol/L;乙酸銨=1090

色譜柱:C18色譜柱,4.6×250mm5μm

柱溫:30℃;

流速:1.0 mL/min

進樣量:10μL

檢測波長:293nm

1.4溶液配制

1.4.1乙酸銨溶液(0.02mol/L

稱取1.54g乙酸銨,溶于水并稀釋至1L

1.4.2氫氧化鈉溶液(20g/L

準確稱取20g 氫氧化鈉,溶于水并稀釋至1L

1.4.3硫酸鋅溶液(120g/L

稱取120g硫酸鋅,溶于水并稀釋至1L

1.4.4脫氫乙酸標準貯備液(1.0mg/mL

準確稱取脫氫乙酸標準品0.1000g(精確至0.0001g)于100mL容量瓶中,用10mL氫氧化鈉溶液(20g/L)溶解,用水定容。4℃保存,有效期為3個月。

1.4.5脫氫乙酸標準工作液(50μg/mL

準確吸取脫氫乙酸貯備液5.0mL100mL容量瓶中,用水定容。4℃保存,有效期為1個月。

1.4.6脫氫乙酸標曲實驗工作液

分別吸取脫氫乙酸標準工作液(50μg/mL0.5mL1.0mL2.0mL10mL20mL100mL容量瓶中,用水定容。配制成濃度為0.25μg/mL0.50μg/mL1.00μg/mL5.00μg/mL10.00μg/mL標曲實驗工作液。4℃保存,有效期為1個月。

2 結果與討論

2.1 系統適用性

1. 空白色譜圖

4.png

2. 脫氫乙酸標準品色譜圖

5.png

2. 脫氫乙酸標準品色譜參數

說明:由上述譜圖可見,脫氫乙酸標準品色譜峰正常,保留時間為9.852 min,理論塔板數為9000以上。

2.2 標準曲線

6.png

3. 脫氫乙酸標準曲線及相關系數

說明:本次測試的脫氫乙酸標準工作曲線濃度為0.25μg/mL0.50μg/mL1.00μg/mL5.00μg/mL10μg/mL。脫氫乙酸標準曲線線性范圍較好,線性相關系數>0.999,滿足實驗分析需求。

2.3 重復性

4. 脫氫乙酸標準品重復性實驗色譜圖


8.png

3. 脫氫乙酸標準品色譜參數

說明:脫氫乙酸標準品重復進樣6次,保留時間RSD值為0.103%,峰面積RSD值為0.371%,重復性較好。

2.4 樣品測試

選擇醬黃瓜作為基質,稱取樣品4.9968g,置于25mL離心管中,加入約10mL水、5mL硫酸鋅溶液(120g/L),用氫氧化鈉溶液(20g/L)調pH7.5,轉移至25mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻。置于25mL離心管中,超聲提取10min4000r/min離心10min。取上清液經過0.45μm有機濾膜,進樣量10μL,供高效液相色譜儀測定。

5. 醬黃瓜樣品溶液色譜圖

10.png

4. 醬黃瓜樣品溶液色譜參數

11.png

5. 醬黃瓜樣品脫氫乙酸使用量

*指標要求源于《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》GB2760-2014

說明:通過計算得醬黃瓜中脫氫乙酸濃度為0.507μg/mL,檢出限為0.0294μg/mL,定量限為0.0980μg/mL,滿足《食品安全國家標準 食品中脫氫乙酸的測定檢測方法》GB 5009.121-2016高效液相色譜法方法要求。醬黃瓜樣品脫氫乙酸使用量為0.0025g/kg,滿足《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》GB2760-2014脫氫乙酸最大使用量要求,檢測結果正常。

2.5 注意事項

1. 本實驗方法中水相流動相含量較高,使用常規C18色譜柱實驗時可能會出現脫氫乙酸峰形較差等問題,親水型的C18色譜柱會表現更好;

2. 脫氫乙酸標準貯備液及相關工作液均需在4℃條件下保存,實驗前要注意溶液的有效期。

3   結論

本次采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置紫外檢測器,依據《食品安全國家標準 食品中脫氫乙酸的測定檢測方法》GB 5009.121-2016 高效液相色譜法進行檢測。實驗結果顯示,脫氫乙酸的線性良好,R值在0.999以上,脫氫乙酸標準品色譜峰正常,理論塔板數在9000以上。脫氫乙酸標準品重復進樣6次,保留時間RSD值為0.103%,峰面積RSD值為0.371%,重復性較好。以醬黃瓜作為測試樣品,可得醬黃瓜樣品中脫氫乙酸濃度為0.507μg/mL,檢出限為0.0294μg/mL,定量限為0.0980μg/mL。醬黃瓜樣品脫氫乙酸使用量為0.0025g/kg,檢測結果正常。說明了該方法配備皖儀科技LC3200系列儀器滿足醬黃瓜中脫氫乙酸的檢測需求。



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