皖儀科技液相色譜測定食品中三氯蔗糖含量

摘要：本文建立了一種高效液相色譜法測定食品中三氯蔗糖含量的分析方法。結(jié)果表明0.01-0.50mg/mL濃度范圍內(nèi)曲線方程為lg(y)=1.56048*lg(x)-1.44911，線性相關(guān)系數(shù)大于0.999，具有良好線性，符合實驗要求。該方法準(zhǔn)確可靠、靈敏度高，可用于食品中三氯蔗糖的檢測。

前言：三氯蔗糖，俗稱蔗糖素，是一種高倍甜味劑，分子式為C12H19Cl3O8。三氯蔗糖特點具有無能量，高甜度，純正甜味，安全度高等，也是最理想的甜味劑之一。 參考標(biāo)準(zhǔn)GB22255-2014是使用高效液相色譜法測定食品中三氯蔗糖含量的分析方法。樣品中三氯蔗糖用甲醇水溶液提取，除蛋白、脂肪，經(jīng)固相萃取柱凈化、富集后用高效液相色譜儀、反相C18色譜柱分離，蒸發(fā)光散射檢測器或者示差檢測器檢測，根據(jù)保留時間定性，峰面積定量。

1 實驗方法

1.1 儀器配置

1.2 測試條件

色譜柱：C18 5μm, 4.6×250mm；

柱溫：35℃；

霧化器溫度：85℃；

蒸發(fā)管溫度：85℃；

蒸發(fā)光氣體流速：0.1SLM流速：1.0 mL/min；

流動相：乙腈/水=20/80；

進(jìn)樣量：20μL。

1.3 設(shè)備及試劑、耗材

試劑：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：三氯蔗糖；

甲醇：色譜純；

乙腈：色譜純。

設(shè)備：萬分之一分析天平；

渦旋混合器；

水浴鍋；

超聲脫氣裝置。

耗材：蒸發(fā)皿；

濾膜：水相針式濾器（聚醚砜）0.45μm。

1.4 標(biāo)樣制備

1.4.1三氯蔗糖標(biāo)準(zhǔn)儲備液

稱取0.10g（精確至0.0001g）三氯蔗糖標(biāo)準(zhǔn)品，于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻，配制成質(zhì)量濃度為10.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。置于4℃冰箱中冷藏保存。保存期6個月。

1.4.2 三氯蔗糖標(biāo)準(zhǔn)工作液

分別移取0.01mL、0.02mL、0.05mL、0.10mL、0.20mL、0.50mL的三氯蔗糖標(biāo)準(zhǔn)貯備液于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，配成三氯蔗糖濃度分別為0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.05 mg/mL、0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.50mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.5 樣品前處理

稱取混勻后試樣5g(精確到0.001g)，置于50mL蒸發(fā)皿中，于沸水浴上蒸干，殘渣用1.00mL乙腈水溶液（11+89）溶解，溶液過0.45μm濾膜，濾液為制備的試樣溶液，備用。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

取濃度0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.05 mg/mL、0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.50mg/mL三氯蔗糖標(biāo)準(zhǔn)工作液，按照1.2的測試條件進(jìn)樣分析，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，采用外標(biāo)法建立工作曲線。結(jié)果如圖1所示。三氯蔗糖在0.01-0.50mg/mL濃度范圍內(nèi)曲線方程為lg(y)=1.56048*lg(x)-1.44911，R平方值為0.99972，具有良好線性關(guān)系，符合實驗要求。圖2-圖7為標(biāo)準(zhǔn)品單點出峰譜圖。

      圖1 三氯蔗糖系列校準(zhǔn)曲線線性圖

       圖2 三氯蔗糖0.01mg/mL出峰譜圖

       圖3 三氯蔗糖0.02mg/mL出峰譜圖

        圖4 三氯蔗糖0.05mg/mL出峰譜圖

       圖5 三氯蔗糖0.10mg/mL出峰譜圖

       圖6 三氯蔗糖0.20mg/mL出峰譜圖

       圖7 三氯蔗糖0.50mg/mL出峰譜圖

2.2 樣品

某酒類樣品色譜圖見圖8，三氯蔗糖無出峰，未檢出。

          圖8 某酒類樣品色譜圖

3 結(jié)論

本文使用皖儀LC3200系列高效液相色譜儀對食品中的三氯蔗糖進(jìn)行了檢測，結(jié)果表明在0.01-0.50mg/mL濃度范圍內(nèi)曲線方程為lg(y)=1.56048*lg(x)-1.44911，R平方值0.99972，具有良好線性，符合實驗要求。且在某酒類樣品中未檢測出三氯蔗糖。