成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>選購指南>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

問題解析:熒光定量PCR反應結束無擴增曲線

來源:本生(天津)健康科技有限公司   2024年02月29日 10:39  

  問題解析:熒光定量PCR反應結束無擴增曲線


  熒光定量 PCR反應結束無擴增曲線出現這個問題的常見原因,主要可以歸結為以下幾種:

  反應循環數不夠:一般建議設置循環數為 40。

  程序中未設置信號采集步驟:注意,兩步法擴增程序一般將信號采集設置在退火延伸階段;三步法擴增程序應當將信號采集設置在 72 度延伸階段。

  引物降解:長時間未使用的引物應先通過 PAGE 電泳檢測完整性,以排除引物降解的可能性。

  模板濃度太低:這個大家減少稀釋度重復實驗就可以了,一般來說,未知濃度的樣品先從最高濃度做起。

  模板降解:無解,請重新制備模板,可以重復實驗。

  溶解曲線形狀異常

  (1)雜峰在主峰之前,Tm 約為 70 - 75℃——一般為引物二聚體


656.png


  這種情況主要有三個解決方法:

  重新設計引物;

  雜峰為引物二聚體,熒光定量 PCR引物二聚體主要是由于體系內引物與引物糾纏比引物與模板結合更容易導致的,可以嘗試提高模板濃度、退火溫度或者降低引物濃度來進行改善;

  另外,當目的基因表達量極低時,染料法容易形成引物二聚體產物影響實驗結果,此時,建議使用探針法定量。

  (2)雜峰在主峰之后,非引物二聚體

  上圖這種情況就是非特異性擴增,可能是引物特異性不好引起的,也可能是空氣中有氣溶膠污染所導致。

  大家可以先增加退火溫度再試試看,如果沒有改善,那么就需要重新更換引物啦。

  為了避免這種麻煩,BUNSEN本生小編建議大家在進行熒光定量 PCR實驗之前,就對自己的引物做一個特異性驗證。另外,每次試驗的 NTC(no template control)是一定要做的。

  (3)只有引物二聚體,無目的條帶

  如果擴增片段過短(小于 80bp),那么僅通過融解曲線就很難區分引物二聚/目的條帶。

  另外,也有可能是 熒光定量 PCR 擴增效率低或者沒有擴增,體系里邊只有引物糾纏成的二聚體了。

  總之,產物長度建議大家還是設置在 100 - 200 bp,不要太短了。

  注:以上資料僅供參考!

  熒光定量PCR 本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 免费一级特黄欧美大片久久网| 男人午夜天堂av| 2020男人天堂网| 日本三级香港三级国产三级| 欧州又粗又大又长八A片| 亚洲一卡久久4卡5卡6卡7卡| 日韩AV无码一区二区三区不卡毛片| 免费看污又色又爽又黄的小说| 久草在线精品ac| 久久伊人五月丁香狠狠色| 日本欧美一区二区免费视频| 国产在线拍小情侣国产拍拍偷| 中文字幕亚洲欧美日韩专区| 亚洲无人区编码国产激情| 日本熟妇乱人免费视频| 欧美亚洲一区二区三区精品| 豪妇荡乳1一5潘金莲| 久久99精品国产麻豆不卡| 快穿之肉她好舒服HHH| 97人妻免费线观看2018| 做A爰片久久毛片A片的价格| 性色AV久久一区二区| 在线播放在线观看影视| 国产SUV精品一区二区883| 久久久精品久久久久三级| 毛片免费高清免费| 国产精品人妻熟女a8198v久| 日本AAAA级毛卡片免费观看| 亚洲欧美另类久久久| 国产性夜夜春夜夜爽免费下载| 欧美日韩国产一区二区| 女人本色HD高清在线播放| 韩日午夜在线资源一区二区| 成熟人妻AV无码专区A片| 第一次挺进苏雨瑶的身体电影| 亚洲精品18久久久久久| 国产欧美一区二区三区免费| 国产精品天干天干在线观看| 亚洲高清男人天堂| 亚洲一区日韩专区| 伊人亚洲综合网色|