Q：可以單獨訂購Nucleofector®試劑盒中的組分嗎？

A：Nucleofector®試劑盒僅作為完整的試劑盒提供，不單獨提供試劑盒中的任何組分。

Q：試劑盒中的Solution冷凍了，會有影響嗎？

A：只要Solution中沒有添加Supplement組分，就沒有影響，即使是幾個月的長期儲存也不會改變Solution的性能。但是，如果添加Supplement后進行了冷凍，檢查是否有沉淀物，如果存在沉淀物，需要進行測試，以排查是否影響性能。

Q：Nucleofector®試劑盒中包含的pmaxGFP對照載體適合穩定表達嗎？

您的pmaxGFP對照載體是否與Nucleofector®試劑盒一起提供，適合穩定表達？

A：不適合。該載體僅作為陽性對照使用，不能用于篩選，因為它不包含哺乳動物選擇標記。該載體表達的抗性基因是卡那霉素，只適合細菌篩選。

Q：有哪些方面可以優化，提升DNA轉染T細胞后的活率？

A：盡量將DNA量保持在較低水平（例如，每100 µL反應1µg質粒DNA），因為較高的DNA量可能會導致毒性，增加死亡率；使用高純度的DNA也很重要，例如使用Endofree™ 質粒試劑盒（Qiagen）；另外A260:A280的比例應至少為1.8。

Q：在電轉實驗中，瞬時基因表達的最佳孵育時間是多少？

A：最佳孵育時間為2-6天。這取決于各種因素，如蛋白質在培養基中的穩定性，蛋白質的潛在毒性、細胞密度和質粒在細胞核中的穩定性。

可以在轉染后24、48、72和96小時取出等份樣品進行摸索，測定蛋白質表達。

Q：小鼠的年齡對小鼠T細胞轉染重要嗎？

A：我們建議使用6-12周的小鼠。從太年輕或太老的小鼠中分離的T細胞進行核電轉都可能會導致轉染效率和活率偏低。