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熒光定量PCR儀的工作原理是什么?

來源:德國耶拿分析儀器有限公司   2024年02月26日 13:24  
  熒光定量PCR儀的工作原理是一種結合了聚合酶鏈式反應(PCR)和熒光檢測技術的先進分子生物學工具。它的核心在于利用熒光信號來實時監測PCR過程中DNA或RNA樣本的擴增情況,從而實現對目標基因的精確定量分析。
  在熒光定量PCR中,首先需要將待測樣本與特異性引物、DNA聚合酶以及熒光基團或熒光標記的探針混合,形成一個反應體系。然后,通過設定特定的PCR程序,如退火溫度、延伸時間等,使得DNA片段在PCR儀中進行擴增。
  在PCR反應過程中,每當一個DNA片段被擴增時,與之結合的熒光基團或探針就會發出熒光信號。熒光定量PCR儀通過高靈敏度的熒光檢測系統,實時收集并分析這些熒光信號,將其轉化為數字信號,從而精確地反映出PCR產物的生成量。
  與傳統的PCR技術相比,熒光定量PCR儀具有更高的靈敏度和特異性。它不僅可以檢測到極低濃度的DNA或RNA樣本,而且可以區分不同的基因序列,避免了非特異性擴增的干擾。此外,通過軟件對熒光信號的定量分析,可以準確地計算出樣本中目標基因的拷貝數或表達量,為科研工作者提供了更加準確、可靠的數據支持。
  總之,熒光定量PCR儀的工作原理是基于PCR技術和熒光檢測技術的結合,通過實時監測熒光信號的變化來實現對DNA或RNA樣本的定量分析。它具有高靈敏度、高特異性以及準確可靠的定量分析能力,為分子生物學研究、病原體檢測、基因表達分析等領域提供了重要的技術支持。

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