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Advanced BioMatrix丨HyStem巰基改性透明質酸使用說明

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2024年02月19日 16:50  

HyStem巰基改性透明質酸基于交聯巰基修飾透明質酸技術。透明質酸是存在于結締組織、上皮組織和神經組織的胞外基質中的天然成分。通過HyStem®,研究人員可以創建可定制的3D水凝膠,用于培養細胞,其自然環境富含透明質酸。HyStem®水凝膠套裝包括:- Glycosil®(巰基修飾透明質酸)- Extralink®-LitePEGDA,聚乙二醇丙烯酸二丙烯酯)重組緩沖液(PBSHyStem®套裝組分混合后形成透明水凝膠。除了重組緩沖液外,其余組分均以凍干固體包裝,被氮氣包裹并在輕微真空下長期儲存。

 

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艾美捷HyStem巰基改性透明質酸ABM-GS310F細胞附著

HyStem®水凝膠系統提供了一種可變剛度的粘彈性基質,支持干細胞的擴張(迄今已測試了人類胚胎干細胞、CD34+和肝細胞前體細胞)。HyStem®水凝膠不支持表面細胞附著。細胞必須被封裝在水凝膠內。細胞外基質(ECM)蛋白或肽可以與Glycosil在交聯之前混合,以提供附著信號,并允許細胞附著在水凝膠表面。然而,添加的ECM蛋白類型取決于細胞類型和期望的結果(擴張而無分化或伴隨分化)。

 

儲存Glycosil:儲存在-20°C,可保存一年。重組溶液必須在同一天使用,不能重新冷凍。Extralink-Lite:儲存在-20°C,可保存一年。重組溶液可在-20°C保存一個月。重組緩沖液:儲存在4°C或室溫,可保存一年。

 

HyStem巰基改性透明質酸使用說明

GlycosilExtralink-Lite溶液通過用重組緩沖液溶解凍干固體來準備。重組后,GlycosilExtralink-Lite將在pH約為7.41X磷酸鹽緩沖液(PBS)中。按照說明重組后,套裝將能夠產生2.57.512.5毫升的材料以形成3D水凝膠。1)讓套裝組分室溫恢復1小時。2)使用注射器和針頭用重組緩沖液重組套裝組分。如果在重組過程中移除瓶塞,請盡量減少暴露在氧氣中,以避免潛在的自交聯。3)在加入重組緩沖液后,立即將每個小瓶渦旋幾秒鐘。將小瓶水平放置在搖床或搖床上。每隔15分鐘快速渦旋樣品。有些組分可能需要>2小時才能完-全溶解。加熱至37°C并輕輕渦旋將加速溶解。組分將變清澈且略帶黏稠。4)將Extralink-Lite1:4的體積比例加入到Glycosil中形成3D水凝膠。1. - 對于2.5毫升和7.5毫升套裝:0.25毫升Extralink-Lite1.0毫升Glycosil,對于2.5毫升和7.5毫升套裝對于12.5毫升套裝:2.5毫升Extralink-Lite10.0毫升Glycosil2. 用移液器混合。3. 如果封裝細胞,請在加入Extralink-Lite之前將細胞沉淀重懸于Glycosil溶液中。來回移液以混合。4. 將所有組分混合后,等待5分鐘,然后再次用移液器混合以確保細胞均勻分布。5)將HyStem注入所需的培養皿。凝膠化將在約15分鐘內開始,完-全凝膠化將在約90分鐘內發生。


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