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  羥基磷灰石（hydroxyapatite；HA）熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

主要用途

  羥基磷灰石（hydroxyapatite；HA）熒光染色試劑是一種旨在使用四環(huán)素染色技術(shù)，與羥基磷灰石結(jié)合，來分析樣品中亮黃色熒光現(xiàn)象的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于成骨干細(xì)胞培養(yǎng)、原生代成骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞類細(xì)胞株、骨材料等樣品中羥基磷灰石的檢測(cè)。廣泛用于骨細(xì)胞分化、牙組織和眼球疾病的病理生理的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，熒光清晰。

技術(shù)背景

羥基磷灰石（hydroxyapatite；HA）為無機(jī)礦化物，分子式為Ca10(PO4)6(OH)2 ，存在于生物硬組織中，尤其是骨組織中（占60至70%），且常用于人工合成的骨替代物和植入涂層材料（implant coating material）。四環(huán)素（tetracycline）為常用抗生素，與羥基磷灰石特異性結(jié)合，產(chǎn)生亮黃色熒光（激發(fā)波長(zhǎng)405nm，散發(fā)波長(zhǎng)525nm），由此檢測(cè)羥基磷灰石。

產(chǎn)品內(nèi)容

  清理液（Reagent A）             毫升

  固著液（Reagent B）            毫升

  染色液（Reagent C）            毫升

產(chǎn)品說明書               1份

保存方式

保存  染色液（Reagent C）在-20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；  染色液（Reagent C），避免光照；有效保證6月

用戶自備

（共聚焦）熒光顯微鏡：用于組織細(xì)胞染色后觀察分析

實(shí)驗(yàn)步驟

1． 準(zhǔn)備好待測(cè)樣品

2． 小心加上xx微升  清理液（Reagent A）在樣品表面上，鋪滿整個(gè)樣品表面

3． 小心移去切片上的  清理液（Reagent A）

4． 小心加上xx微升  固著液（Reagent B）在樣品表面上，鋪滿整個(gè)樣品表面

5． 在4冰箱里孵育10分鐘

6． 小心移去  固著液（Reagent B）

7． 小心加上xx微升  清理液（Reagent A）在樣品表面上，鋪滿整個(gè)樣品表面

8． 小心移去  清理液（Reagent A）

9． 小心加上xx微升  染色液（Reagent C），鋪滿整個(gè)樣品表面

10． 室溫下孵育20分鐘，避免光照

11． 小心移去  染色液（Reagent C）

12． 小心加上xx微升  清理液（Reagent A）在樣品表面上，鋪滿整個(gè)樣品表面

13． 室溫下孵育1分鐘

14． 小心移去  清理液（Reagent A）

15． （選擇步驟）封片

16． 即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下（激發(fā)波長(zhǎng)405nm，散發(fā)波長(zhǎng)525nm）觀察：

羥基磷灰石：呈現(xiàn)亮黃色熒光

注意事項(xiàng)

1． 本產(chǎn)品為20次操作

2． 操作時(shí)，須帶手套

3． 試劑溶液在樣品表面時(shí)，避免有氣泡存在，同時(shí)確保鋪滿樣品表面

4． 染色完成后，即刻進(jìn)行熒光顯微鏡觀察 

5． 如果檢測(cè)眼組織的羥基磷灰石，注意角膜的自發(fā)熒光的干擾

6． 本公司提供系列骨組織染色試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰