螢光素酶在ATP、Mg2+和O2的條件下催化D-螢光素鉀鹽進行氧化脫羧反應,發出平均波長為560nm的藍綠色熒光。當螢光素鉀鹽過
量時,產生的光量子數與螢光素酶的濃度呈正相關性。由于其方便檢測、定量準確、在生物技術領域有著非常廣泛的應用,特別是體內活體成
像領域和報告基因技術領域。

二,D-螢光素鉀鹽的使用方法
1. 溶液的制備
D-熒光素鉀鹽的溶液可以用于染色、標記、檢測等多種應用。
制備D-熒光素鉀鹽溶液的方法:
a.首先稱取適量的D-熒光素鉀鹽,加入適量的去離子水中后進行均勻攪拌;
b.使用過濾膜將溶液過濾,除菌。
c.將D-熒光素鉀鹽溶液調節至所需要的濃度。
2. 染色實驗過程
D-熒光素鉀鹽可以用于細胞染色、組織染色等染色實驗,實驗方法如下:
a.首先將細胞或組織樣本固定在載玻片上。
b.然后加入適量的D-熒光素鉀鹽溶液,使試劑溶液可以覆蓋樣本。
c.在黑暗條件下可以孵育一段時間,使D-熒光素鉀鹽充分滲透入細胞或組織中。
d.使用PBS緩沖液洗滌樣本,去除多余的D-熒光素鉀鹽。
e.在顯微鏡下觀察樣本,觀察樣品的熒光信號。
3. 實驗標記
D-熒光素鉀鹽也可以用于標記蛋白質、核酸等生物分子。
實驗標記方法:
a.首先將蛋白質或核酸與d-熒光素鉀鹽共同孵育。
b.再用凝膠電泳等方法分離標記后的生物分子。
c.最后在熒光顯微鏡下觀察標記后的生物分子即可。
4. 檢測方法
D-熒光素鉀鹽可用于檢測生物分子的存在和濃度。
D-熒光素鉀鹽檢測方法:
a.將d-熒光素鉀鹽與待檢測的生物分子進行共同孵育。
b.用凝膠電泳等方法分離孵育后的混合物。
c.在熒光顯微鏡下觀察熒光信號,即可判斷生物分子的存在和濃度。
三,逐典D-螢光素鉀鹽優勢
1.高純度(HPLC驗證純度≥99%)
2.優異的生物發光性能
3.高溶解度(>40mg/ml)
四,應用場景
D-熒光素鉀鹽在不同領域具有多種應用場景。其中包括蛋白表達研究、抗腫瘤或抗病物研究以及mRNA疫苗開發等。
蛋白表達研究:將Luc基因插入需要研究的蛋白中,可用于定量目標蛋白在實驗動物體內的表達情況。
抗腫瘤或抗病物:在腫瘤細胞或病毒中導入Luc基因,建立腫瘤或病毒感染小鼠模型,注射藥物后,通過活體成像技術觀測腫瘤大小或病毒感染的變化。
mRNA疫苗開發:在mRNA中插入Luc基因,脂質體包裹后注射實驗動物后,可通過活體成像技術可觀測疫苗的免疫效果。
五,應用案例分享


免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。