ELISA實驗以其靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對實驗的檢測效果影響較大,如不注意,就有可能產生不準確的結果。今天我們就來介紹一下實驗中加樣可能會碰到的問題。
1、加樣時間過長(特別是室內溫度較高時)。遇到這種情況,如果標本為血清的話,可以將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;如果標本為血漿,就必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2、手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱的時候需要等待。如果標本較多時,可以分批操作,加樣后一定要及時放入孵箱。
3、加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外,血清或血漿標本分離不好即進行加樣。遇到這種情況,可以在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。如果采用AT或其他全自動加樣,請選擇FAME或其他處理儀器加酶試劑。
為了得到準確的結果,必須嚴格按照操作步驟進行加樣,同時做好室內質控,要以嚴謹的工作態度檢測每一份標本。
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