對于制藥或生物醫(yī)學(xué)相關(guān)方向的同學(xué)來說，熱源污染即細(xì)菌內(nèi)毒素污染是一個(gè)令人頭疼得問題。

本篇本著“熱愛生活，防毒避綠”的原則為各位小主們獻(xiàn)上內(nèi)毒素檢測指南。

假如生活欺騙了你, 內(nèi)毒素綠了你，不要悲傷, 不要心急! 憂郁的日子里須要鎮(zhèn)靜, 相信吧, 今天獻(xiàn)上的防毒避綠指南將是你綠環(huán)陰影下的那縷光~

說到內(nèi)毒素，大家都誰知道，藥典明文又規(guī)定，化學(xué)藥品的注射劑及原 料藥、疫苗、血液制品以及注射用輔料等，只要涉及到注射、植入，并標(biāo)榜“無菌、無熱源”的，就得過內(nèi)毒素檢測（中國藥典9251）的關(guān)。當(dāng)然以上這些大家都知道，不再做贅述。

一，那么現(xiàn)行的內(nèi)毒素檢測方法有哪些呢？

中國藥典 2020 年版中收載了包括家兔、凝膠法、光度法、重組C因子等4大類檢查方法，以及近年來比較受關(guān)注的微量凝膠法，下面對各類方法進(jìn)行了對比：

這么多方法，怎么選呢？選擇困難癥怎么辦？不捉急，瑋馳有l(wèi)onza的針對各類中國科研小主們需求定制的數(shù)套內(nèi)毒素檢測方案供大家選擇，檢測更靈敏、應(yīng)用更成熟，直接對號入座吧：

二，動態(tài)顯色法：

產(chǎn)品：Kinetic-QCL™ Kinetic Chromogenic LAL Assay （動態(tài)顯色法）
•檢測方法一動態(tài)檢測顏色變化
•最大靈敏度一0.005EU/mL
•儀器一帶溫控的酶標(biāo)儀（405nm）

•反應(yīng)時(shí)間一1小時(shí)左右，視樣品內(nèi)毒素限值而定

優(yōu)勢：
• Lonza內(nèi)毒素檢測方法

•抗干擾能力強(qiáng)，抵抗各種抑制性分子
•尤其是生物制品如疫苗、抗生素等的理想選擇。

三，動態(tài)濁色法：

產(chǎn)品：PYROGENT™-5000 Kinetic Turbidimetric LAL Assay （動態(tài)濁度法）

•檢測方法一動態(tài)檢測濁度變化

•最大靈敏度一0.01EU/mL

•儀器一帶溫控的酶標(biāo)儀（340nm）

•反應(yīng)時(shí)間一1小時(shí)左右，視樣品內(nèi)毒素限值而定

優(yōu)勢：水樣品和大容量注射液體檢測更經(jīng)濟(jì)。

四，凝膠法：

產(chǎn)品:PYROGENT™ Plus Gel Clot LAL Assay （凝膠法）

•檢測方法一肉眼觀察凝膠的形成

•最大靈敏度一0.03EU/mL

•儀器一水浴鍋或金屬浴

,反應(yīng)時(shí)間一1小時(shí)

優(yōu)勢:

•方法簡單，不需要復(fù)雜的儀器和軟件

•成本低

Lonza內(nèi)毒素無論是從均一性，還是從性狀等維度都經(jīng)過太多的高分文獻(xiàn)的驗(yàn)證，下面總結(jié)了若干條高分文獻(xiàn)以供大家參考使用。

[1] Ong K G, Leland J M, Zeng K, et al. A rapid highly-sensitive endotoxin detection system [J]. Biosens Bioelectron, 2006, 21(12): 2270-2274.

[2] Su W, Ding X. Methods of Endotoxin Detection [J]. J Lab Autom. 2015, 20(4): 354-364.

[3]: 裴宇盛, 蔡彤, 高華. 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查新方法進(jìn)展 [J]. 藥物分析雜志, 2014, 34(3): 392-395.

[4]:裴宇盛, 蔡 彤, 陳 晨, 等. 重組 C 因子法檢測福沙匹坦二葡甲胺中細(xì)菌內(nèi)毒素的方法學(xué)研究 [J]. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué), 2019, 36(1): 1-4.

[5]:Burkhardt M, LopezAcosta A, Reiter K, et al. Purification of soluble CD14 fusion proteins and use in an electrochemiluminescent assay for lipopolysaccharide binding [J]. Protein Expression Purif, 2007, 51(1): 96-101

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[7]:Hreniak A, Maruszewski K, Rybka J, et al. A luminescence endotoxin biosensor prepared by the sol-gel method [J]. Opt Mater (Amsterdam, Neth) 2004, 26(2): 141-144.

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[9] Priano G, Pallarola D, Battaglini F. Endotoxin detection in a competitive electrochemical assay: synthesis of a
suitable endotoxin conjugate [J]. Anal Biochem, 2007, 362(1): 108-116.

[10] Priano G, Battaglini F. Use of an antimicrobial protein for endotoxin detection in a competitive electrochemical assay [J]. Anal Chem, 2005, 77(15): 4976-4984.

[11] Oliveira M D L, Andrade C A, Correia M T, et al. Impedimetric biosensor based on self-assembled hybrid cystein-gold nanoparticles and CramoLL lectin for bacterial lipopolysaccharide recognition [J]. J Colloid Interface Sci, 2011, 362(1): 194-201.