使用儀器
本研究使用了The RMC Boeckeler PowerTome。它配備了一個機械推進系統，該系統具有一個高重復性切割臂推進的精密數字線性標尺。這款先進的超高倍顯微鏡還配有觸摸屏電腦和帶高清攝像頭的三目立體顯微鏡，用于拍攝切片時的圖片和視頻。該成像系統還有一個測量工具，可用于測量切片尺寸和面積，以便與樣品塊表面的尺寸和面積進行比較，從而估算切片壓縮量。

程序

將小鼠脾臟固定在4%甲醛和1%戊二醛中，并后包埋在來自電子顯微鏡科學公司（EMS，哈特菲爾德，賓夕法尼亞州，美國）的Embed 812樹脂中。這是一種常用的EPON812替代樹脂，是許多實驗室中用于生物標本的環氧樹脂混合物的代表。按照制造商的說明，使用硬混合物。使用生產PT PCZ超薄切片機進行切片。使用Mitutoyo千分尺（型號#ID-C112E)，通過獨立的方法驗證切割臂的機械前進，該測微計（千分尺）可以讀取1um增量的線性距離。使用儀器控制器使切片臂前進10 um,并將這些距離與Mitutoyo千分尺在切割臂整個200um前進范圍內的讀數進行比較。這兩個讀數在1%的誤差范圍以內。切割臂的機械推進是通過步進電機和數字線性推（前）進系統的反饋控制來實現的，因此，超薄切片的較小推進預計也同樣準確。例如，100納米步進多個累加增量導致在Mitutoyo千分計上的讀數與1微米和10微米的較大進階相同。

在30nm至400nm范圍內切割切片，并在切片時和在CHCI3蒸汽”拉伸”（減壓）后拍照。設置相機的增益和曝光設置，使得生成的圖像與通過立體顯微鏡直接觀察到的顏色和亮度緊密匹配。使用圖像處理軟件lmageJ（NIH，USA)排列切片圖像，以產生圖2。